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- 2019-03-08 发布于山西
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目标导航预习导引目标导航预习导引一二一、分离蛋白质的原理与方法1.分离蛋白质的原理2.分离蛋白质的方法(1)凝胶色谱法①概念:根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法,也叫分配色谱法。目标导航预习导引一二②过程及原理b.分离的过程目标导航预习导引一二c.分离原理:依据相对分子质量的不同而将蛋白质分离。(2)电泳法①电泳的概念:指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。②原理:利用了待分离样品中各种分子的带电性质的差异、分子本身的大小以及形状的不同,使带电分子在电场中产生不同的迁移速度,从而分离样品中的各种分子。③分离方法:琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。其中后者使用时通常加入带负电荷多的SDS,形成“蛋白质-SDS复合物”,使蛋白质迁移速率仅取决于分子的大小。3.缓冲溶液(1)组成:通常由1~2种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的使用比例,可配制不同pH的缓冲液。(2)作用:抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变。目标导航预习导引一二缓冲溶液中含对酸碱起缓冲作用的缓冲对,每一缓冲对均由弱酸和相应的强碱盐组成。细胞外液也有酸碱缓冲对,你能回忆并说出细胞外液中的酸碱缓冲对吗?提示:细胞外液中主要的酸碱缓冲对有:H2CO3/NaHCO3、NaH2PO4/Na2HPO4等。目标导航预习导引一二二、凝胶色谱法的实验操作1.蛋白质的提取和分离步骤(1)样品处理血红蛋白的释
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