流式细胞仪试验室FlowCytometerRoomA3618.DOC

流式細胞儀實驗室 Flow Cytometer Room (Ａ32-618) 介紹： 微生物與免疫學系新購置之流式細胞儀，係承蒙院內專案計畫經學校同意採購之貴重儀器，流式細胞儀型號：FACScan Becton Dickinson ( HYPERLINK .tw/ .tw)，該儀器於92學年度正式啟用；流式細胞儀利用雷射光激發螢光染體及散射偏光之測量原理，對微顆立體（0.5 mm ~ 50 mm）例如細胞做一質與量之統計分析；其應用相當廣泛，可用於免疫細胞表面抗原分析，DNA分析，細胞凋亡分析，細胞週期分析，自由基測量，細菌增殖曲線等等，此外，進階流式細胞儀也具有分選功能，可重新回收利用有興趣之特殊細胞或細菌顆粒族群，因此流式細胞儀應用於免疫學，微生物學，細胞學等各項實驗之重要儀器。流式細胞儀實驗室之建立，期望能提供學生對本儀器使用有一瞭解與相關技術之訓練，今後與本校生命科學，農學等系所相關計畫研究相結合，提供研究與教學上之基礎平台。 ? 使用規則與使用者維護： ? ＊ 本系貴重儀器使用與借用規則公佈於本系網站 HYPERLINK .tw/~apmicro/rules/rule9.htm .tw/~apmicro/rules/rule9.htm 規則附加於最後一頁 ? 為延長機器壽命，本儀器之使用需接受BD公司所提供課程訓練， 使用本儀器請先經由資格認定後利用 ＊ 標準操作程序： ? 1.??????? 開啟電源前檢查工作液量 (Sheath Fluid)，至少需為八分滿。 2.??????? 廢液瓶倒掉並加入100ml家用漂白水。 3.??????? 將工作液瓶氣閥打開於加壓位置。 4.??????? 開啟FACScan電源，電腦不要開。 5.??????? 排除過濾器中之氣泡。 6.??????? FALCON 管含培養用PBS接置於樣品吸取管。 7.??????? 旋鈕轉於DRAIN約5至10秒以去除FLOW CELL中可能含有之氣泡，緊接著調旋鈕於FILL使FLOW CELL充滿工作液。反覆2至3次。 8.??????? 前處理後，旋鈕調於STANDBY。 9.??????? 打開電腦電源。 10.???? 使用CELLQUEST軟體進行樣品分析。 建議『狀態』視窗（STATUS WINDOW）能一直保持開啟以利瞭解流式細胞儀工作情況。 11.???? 樣本使用黏稠性高之染劑如propidium iodide(PI), acridine orange etc.需經過濾後方可上機。 12.???? 關機前需使用1：10稀釋之漂白水清洗，樣品支撐柱打開讓樣品吸取管充滿清洗液。反覆清洗2至3次。 13.???? 用過濾水同上步驟清洗2至3次，後將支撐柱移至中央清洗5分鐘。 14.???? FALCON 管中流少於1ml之過濾水，讓機器處於STANDBY 5分鐘後再關機。 （以上為正常開關機步驟） ? ? ? 謝謝您的合作與愛護 ? 定期保養與清潔方法： ? 週保養 1.??????? 無使用狀態下，每週開機並進行使用者維護保養過程。 2.??????? 電腦可不必開機。 ? 月保養 1.??????? 打開氣閥使壓力洩出。 2.??????? 將濾網兩邊塑膠管移開，將白管接於濾網上方接頭，工作液可不經濾網進入機器。工作液瓶中用1：10支稀釋漂白水（FACS CLEAN），關閉氣閥使加壓。 3.??????? DRAIN 與 FILL 2至3次。 4.??????? 3至4ml 之稀釋漂白水裝於FALCON管置於樣本吸取管。樣本吸取速度設於HI；旋鈕轉於RUN 讓機器運行20至30分鐘。 5.??????? 以蒸餾水取代重新執行步驟3至4。 6.??????? 將工作液瓶中之漂白水倒掉，換成蒸餾水 7.??????? 旋鈕置於STANDBY。 8.??????? 打開氣閥，洩壓。 9.??????? 接管於濾網上方接頭，重複清洗動作2至3次。 10.???? 復原管線與濾網兩邊之接頭。 11.???? 換瓶中工作液，並清除廢液瓶。 12.???? 執行一裝有PBS之樣本，讓機器運行5分鐘。 13.???? FACScan 已保養完畢，可以再進行樣品分析試驗。 ? 若您有任何疑問，請聯絡: 翁博群 A32-618 TEL: (05)271-7922 HYPERLINK mailto:brian@.tw brian@.tw