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百尾参止咳活性成分探究 ［摘要］采用小鼠氨水引咳法研究百尾参Disporum cantoniense的止咳作用，利用各种现代色谱技术手段对止 咳活性部位进行化学成分分离与纯化，并根据化合物的理化 性质和光谱数据鉴定结构。结果表明百尾参水提取物及乙醇 提取物均有止咳活性，而乙醇提取物高剂量组的止咳作用高 于阳性对照;从乙醇提取物中首次分离并鉴定了 8个化合物, 分别为豆辎-4-烯-3-酮(1),麦角笛-5, 7, 22-三烯-3 B - 醇 (2 ), obtucarbamate A ( 3 ), obtucarbamate B (4 ), neotigogenin (5),偶氮-2, 2 -双［Z- (2, 3-二懸基 -4-甲基-5-甲氧基)苯基乙烯］(6), dimethyl {［carbonylbis ( azanediyl ) Jbis ( 2-methyl-5 , 1-phenylene) } dicarbamate (7),桝皮素-3-0- 3 -D-毗喃 葡萄糖昔(8),活性跟踪显示化合物3, 4, 6具有止咳作用， 其中化合物6的止咳作用与阳性对照相当。 ［关键词］百尾参；止咳活性；偶氮化合物；化学成分 百尾参为百合科L订iaceae万寿竹属植物万寿竹 Disporum cantoniense (Lour. ) Merr.。其味甘、淡，性平， 具有润肺止咳、健脾消积的功效，可用于治疗虚损咳喘、痰 中带血、肠风下血、食积胀满等症［1-2］ o百尾参是苗族习 用药材，是复方制剂咳速停系列药物的主药。目前，关于百 尾参的研究主要集中在栽培方面[3-6],对其化学成分及生 物活性研究较少[7-10] o为了探究百尾参的止咳活性成分， 采用小鼠氨水引咳法首先研究了百尾参的止咳活性部位，其 乙醇提取物具有明显的止咳作用；其次对乙醇提取部位的化 学成分进行了系统的分离，从中分离鉴定了 8个化合物，分 别为豆笛-4-烯-3-酮(1),麦角辎-5, 7, 22-三烯-3 3- 醇 (2 ), obtucarbama.te A (3 ), obtucarbamate B ( 4 ), neotigogenin (5),偶氮-2, 2’ -双[Z- (2, 3-二羟基- 4-甲基-5-甲氧基)苯基乙烯](6), dimethyl {[carbonylbis ( azanediyl ) ]bis ( 2-methyl-5 , 1-phenylene) } di carbamate (7),彳斛皮素-3-0- 3 -D-毗喃 葡萄糖昔(8),以上化合物均为首次从该植物中分离得到； 最后对分离得到的量大的化合物3, 4及6进行了活性测试, 结果显示3个化合物均有止咳作用，其中化合物6的止咳活 性与阳性对照相当。 1材料 昆明种小鼠(SPF级)，雌雄对半，体重18?22 g,由 长沙东创实验动物科技服务部提供，合格证号SCXK (湘) 2009-0012o 磷酸可待因口服液III,香港万辉药业有限公司，批号 110401。乙醇为食用级，其余试剂均为分析纯试剂，重庆川 东化工(集团)有限公司化学试剂厂。 X-4型熔点仪，温度未校正，北京泰克仪器有限公司生 产；ZF7三用紫外分析仪，购于巩义市予华仪器有限责任公 司；INOVO 400 MHz型核磁共振波谱仪（TMS为内标），美国 Vari an公司生产，JEOL ECX-500 MHz型核磁共振波谱仪（TMS 为内标），日本电子株式会社生产；HP 5973质谱仪，美国安 捷伦公司生产；柱色谱硅胶（200?300目）和薄层用硅胶 GF254 ,青岛海洋化工厂生产；Sephadex LH-20 ,购自 Pharmacia 公司。 药材于2010年8月采自贵州省安顺市，原植物经贵州 师范学院朱富寿教授鉴定为百尾参D. cantoniense,标本保 存于贵州师范学院药用植物研究所。 2方法 2. 1提取物的制备 取上述2份百尾参药材粗粉各40 g,精密称定，分别加 入8倍量食用乙醇、蒸馆水加热回流提取2次，每次3h, 合并2次滤液，减压浓缩至浸膏，精密称定，计算各溶剂提 取物得膏率：乙醇5. 7%,水25. 8%o 2. 2止咳活性研究[11] 取小鼠90只，雌雄各半，随机分成9组，即乙醇提取 物高、低剂量组，水提取物高、低剂量组（生药量5. 80, 1.25 g - kg-1）,生理盐水对照组（空白对照组），磷酸可待因口 服液阳性对照组（300. 0 mg ? kg-1）,单体化合物3, 4, 6 组(300.0 mg ? kg-1),每组10只。每天灌胃(ig)给药1 次，给药体积按20 mL ? kg-1,连续给药6 do末次给药1 h 后，利用氨水气雾引咳法，用超生雾化器均匀地雾化浓氨水