尿分析仪测定的基本原理.doc

PAGE PAGE 1 尿分析仪测定的基本原理 将试剂带蘸入尿液中取出，试剂带上数个含有各种试剂的试剂垫，各自与尿中相应成分进行独立反应，显示不同颜色，颜色的深度与尿液中某种成分的浓度呈正比例关系。将沾附有尿液的试剂带放在仪器比色槽内，已产生化学反应的各种试剂垫被光源照射后，其反射光被球面积分析仪的光电管所接受，再由光信号转变为电信号，然后进一步转化为对应的数值结果，各参数反应原理如下。 （一）尿pH值试验 采用复合指示剂的原理（如溴麝香草酚蓝及甲基红），PH值指示范围为4．8～8．5。本参数可因纸条上残留过多尿液使尿蛋白试垫上的酸性缓冲液污染pH试垫，造成结果偏酸性。被细菌繁殖的尿样可影响pH值结果。 （二）尿蛋白试验 试条浸有四溴酚蓝或四氯酚四溴璜酞指示剂，当尿蛋白浓度由低至高时，其颜色由黄绿色经绿至蓝色，当尿蛋白阴性时，试垫呈原有黄色。 试垫只对白蛋白起反应，不与球蛋白、血红蛋白、本－周蛋白及其他尿蛋白发生反应或仅轻度反应，故尿蛋白阴性并不能排除尿液中其他蛋白的存在，当检验结果与临床诊断不符合时应用其他方法作确认试验。尿蛋白定量与定性的关系如下：当尿蛋白含量为150～300mg／L时，定性试验约为plusmn;，300mg／L约为＋，1000mg／L约为?，3000mg／L约为?。 尿pH大于9，尿中污染季胺盐、氯已定或操作时试条浸入时间过长，可出现假阳性反应。 （三）尿葡萄糖试验 采用葡萄糖氧化酶及过氧化物酶偶联的原理，当尿糖阳性时，试纸显色由黄、桔黄至棕色。本法只对葡萄糖起反应，不与乳糖、半乳糖或果糖等其他糖起反应。尿中含有大量维生素可致本试验出现假阴性；高比重碱性尿，可使糖检出率偏低。当尿中含有过氧化氢、次氯酸盐等强氧化剂干扰时，可呈假阳性反应，故尿容器必须清洁。 （四）酮体试验 试垫内含有亚硝酸基铁氰化钠、甘氨酸及碱性缓冲剂，这些物质可与丙酮或乙酰乙酸作用形成紫色复合物，颜色由淡棕色至紫色。 本试条对乙酰乙酸敏感，敏感度为0．5～1．0mmol／L（5～10mg／d1），对丙酮敏感度较差，与beta;－羟丁酸不起化学反应。酸性尿液、高比重尿、陈旧尿都可使结果呈弱假阳性，尿液中如有酚红或二羟基苯丙胺酸代谢产物可出现假阳性反应。酮体试垫会因受潮而很快失效，故操作时必须在取出试条后立即将盖盖紧，预防纸垫受潮失效。 （五）胆红素试验 采用胆红素重氮反应原理，用重氮化2，4－二氯苯胺及强酸性缓冲液，与胆红素作用后试垫可呈浅黄色至棕黄色。维生素C或亚硝酸盐可降低该法的灵敏度，氯丙嗪可致假阳性反应，尿液会因阳光暴晒而呈假阴性反应。 （六）隐血试验 血红蛋白具有过氧化物酶样反应，能使有机过氧化物与显色原显色，根据血红蛋白的含量不同，垫块颜色由桔黄色变为绿色或深蓝色，试垫不仅与游离的血红蛋白起反应，而且还可与完整的红细胞起反应，在试垫上出现绿色斑点，提示为完整红细胞所致。 垫块检出游离血红蛋白敏感度为150～620mu;g／L，相当于5～15个红细胞／mu;L。高尿比重尿、高蛋白尿会降低该法敏感度，维生素C、甲醛可致假阴性反应。肌红蛋白、强氧化剂如次氯酸钙或某种可产生过氧化物酶的微生物污染尿液，可呈假阳性反应。 （七）亚硝酸盐试验 在酸性条件下亚硝酸盐与对氨基苯胂酸作用，形成重氮化合物与3羟基－1，2，3，4－氨苯喹啉产生桃红色重氮反应。因为许多细菌具有将硝酸盐还原成亚硝酸盐的能力，因此亚硝酸盐试验可作为尿路 细菌性感染的一种过筛试验。但是，如果尿液在膀胱中滞留时间短（少于4～6小时），不足以让细菌还原硝酸盐为亚硝酸盐时可呈阴性或弱阳性反应，故应采晨尿检查为好。食物中完全不含硝酸盐或感染的细菌不具有将硝酸盐转化为亚硝酸盐的功能时呈假阴性反应。某些药物如盐酸苯偶氮吡啶可使尿液呈红色，使测试结果呈现假阳性。 （八）尿胆原试验 对二乙氨基苯甲醛与尿胆原在酸性条件下，可形成红色化合物。尿胆原成分不稳定，很快被氧化成尿胆素，致使出现假阴性。故被检尿液必须新鲜，正常新鲜尿液尿胆原呈弱阳性反应。该法可受许多因素干扰，如用甲醛防腐的尿液或尿液中含有大量亚硝酸盐时呈假阴性反应。 （九）白细胞酯酶试验 利用粒细胞酯酶水解吡咯氨基酸酯与重氮盐作用显色的原理测定尿液中的粒细胞。该试验只对完整的粒细胞起反应，不与淋巴细胞和其他细胞起反应，正常尿液该试验为阴性，其检出灵敏度为（5～15）times;106个白细胞／L。妇女在留取标本时注意不要污染白带。尿液中含有糖、头孢菌素或大量草酸盐可降低该项反应的敏感度。 （十）比重 尿比重试纸是由一种特殊的高分子电解质与pH值指示剂组成。当尿中离子与试垫作用时，氢离子浓度增加，pH值改变，由指示剂显色表示，故比重是由离子浓度间接表示。