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第十一章 生物素—亲和素免疫放大技术
第一部分 目的要求和教学内容
一、目的要求
掌握:生物素—亲和素免疫放大技术、生物素、亲和素的概念,生物素—亲和素免疫放大技术的主要类型,原理和临床应用;
熟悉:生物素—亲和素免疫放大技术的类型、原理及临床应用;
了解:生物素及亲和素特性及其结合抗体的制备方法,各检测技术方法的技术要点。
二、教学内容
1.胶体金与免疫金制备:生物素及亲和素特性及其制备,生物素的制备。
2.生物素—亲和素免疫放大技术的类型、原理。
3.生物素—亲和素免疫放大技术临床应用与评价。
第二部分 测 试 题
一、选择题
(一)单项选择题(A型题)
1.既能用于标记蛋白质氨基,又能标记蛋白质醛基的活化生物素是
A.BNHS
B.BCHZ
C.BHZ
D.MPB
E.BCNHS
2.间接法BA的反应模式为
A.Ag-(Ab-B)-A*
B.Ag-Ab1-(Ab2-B)-A*
C.Ag-(Ab-B)-A-B*
D.Ag-(Ab-B)-AB*C
E.Ag-Ab1-(Ab2-B)-A-B*
3 下列哪一项属于长臂活化生物素
A.BNHS
B.BHZ
C.BCNHS
D.BCHZ
E.MPB
4.MPB是氯化生物胞素与3-(N-马来酰亚胺-丙酰)-N-BNHS在什么溶液中反应后制得的
A.二甲基甲酰胺
B.碳二亚胺
C.N-羟基丁二酰亚胺
D.马来酰亚胺
E.水合肼
5.每个亲和素能结合多少个分子的生物素
A.1
B.2
C.3
D.4
E.5
6.生物素通过噻吩环戊酸侧链上的什么部位与多种大分子偶联
A.羰基
B.-NHC.
羧基
D.-CH3
E.-NH2
7.常用于标记抗体的活化生物素是
A.BNHS
B.BHZ
C.BCNHS
D.BCHZ
E.MPB
8.在生物素标记抗体时,生物素:IgG 的比例(mg/mg)为多少时,效果较好
A.1:1
B.3:1
C.4:1
D.2:1
E.5:1
9.在用生物素标记酶时,酶活性会降低的是
A.HRP
B.葡萄糖氧化酶
C.β-Gal
D.AP
E.LDH
10.亲和素-生物素化碱性磷酸酶(ABAP)复合物的制备是将亲和素溶液与生物素化AP按多少
浓度比反应后制得
A.1:1
B.2:1
C.3:1
D.4:1
E.5:1
11.标记蛋白质氨基的活化生物素是
A.BHZ
B.MPB
C.光生物素
D.生物素脱氧核苷三磷酸
E.BNHS
12.标记蛋白质巯基的活化生物素是
A.MPB
B.BNHS
C.BHZ
D.光生物素
E.生物素脱氧核苷三磷酸
13.制备ABC复合物时,亲和素的浓度不能高于
A.10ug/ml
B.20ug/ml
C.30ug/ml
D.35ug/ml
E.40ug/ml
14.标记核酸的活化生物素,下列哪项除外
A.MPB
B.光生物素
C.生物素脱氧核苷三磷酸
D.BNHS
E.BHZ
15.用活化生物素标记核酸的方法,下列哪项除外
A.缺口移位法
B.光化学法
C.化学偶联法
D.放射免疫法
E.末端标记法
16.下列说法不正确的是
A.标记反应时,活化生物素与待标记抗原或抗体应有适当比例
B.一般每个抗原或抗体分子标记1-3或3-5个生物素分子较为适宜
C.生物素与抗原、抗体等蛋白质结合后,不影响后者的免疫活性
D.生物素与酶结合后,酶活性不受影响
E.为减少空间位阻影响,常在生物素与被标记物间加入交联臂样结构
17.下列哪种方法不能用于制备生物素标记的核酸探针
A.缺口移位法
B.化学偶联法
C.光化学法
D.末端标记法
E.电化学法
二、填空题
1.不受位阻效应影响,更易发挥生物素活性作用的是( )。
2.用于标记蛋白质醛基的,适用范围较BHZ宽的活化生物素是( )。
3.在一定波长的光照射下,光敏基团可转变为芳香基硝基苯而直接与腺嘌呤N7位氨基结合的是( )。
4.生物素化蛋白质衍生物有二类,一种是( ),另一种是( )。
5.用于亲和素标记的物质中,最常用的是( ), ( )和( )。
三、名词解释
1.亲和素
2.BA法
四、简答题
1.简述常用于标记核酸分子的活化生物素有哪几种。
2.简述生物素化蛋白质衍生物的特性。
3.简述BAS的特点。
4.简述几种常用于标记不同类型生物大分子的活化生物素。
5.简述BAS在应用中的二种基本类型。
五、论述题
1.试述ABC法的原理。
2.试述BAB-ELISA夹心法测抗原的原理及过程。
第三部分 参考答案与题解
一、选择题
(一)、单项选择题(A型题)
1 B 2 B 3 C 4 A 5 D 6 C 7 A 8 D 9 D 10 D
11 E 12A13.E 14.A 15.D 16.D
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