恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞CD25测定及临床检验学探究.docxVIP

恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞CD25测定 及临床检验学探究 ［摘要］目的探讨恶性肿瘤患者T淋巴细胞CD25+水平的 临床意义。方法用流式细胞仪检测70名正常人和274例 恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+和CD8+CD25+水平。结果 恶 性肿瘤患者外周血CD4+CD25+水平比正常人高，差异有统计 学意义(P 0. 05)o其中，食管癌、肝癌和肺癌的CD4+CD25+ 水平与正常人比较，差异有统计学意义(P 0. 05)o结论恶 性肿瘤患者外周血CD4+CD25水平的增高可作为恶性肿瘤免 疫诊断的参考指标。 ［关键词］恶性肿瘤；CD4+CD25+； CD8+CD25+；流式细 胞术 ［中图分类号］R446. 6 ［文献标识码］A ［文章编号］ 1674-4721 (2012) 11 (b) -0099-02 CD25+是低亲和性IL-2受体(IL-2R)的a链，表达于 激活的T淋巴细胞、B细胞、NK细胞和巨噬单核细胞表面。 近年来有报道肿瘤患者外周血血清中可溶性白细胞介素2受 体(s订-2R)的水平升高可作为病情判断、监测的免疫指标, 但对外周血淋巴细胞膜白细胞介素2受体(m订-2R)的报告 结果不一［1-4］。为了解恶性肿瘤患者外周血mil-2R (CD25) 活性水平的临床意义，本文对恶性肿瘤患者外周血T淋巴细 胞CD25水平进行了检测分析。 1资料与方法 1.1 一般资料 2010年1月?2011年12月经本院病理细胞学确诊的住 院肿瘤患者274例，其中，食管癌100例、肝癌84例、肠 癌32例、胃癌18例、肺癌18例、鼻咽癌22例；另选择70 名健康体检者作正常对照。 1. 2方法 应用流式细胞仪（美国BD公司，型号FAScalibur）及 美国PharMingen公司的单克隆试剂，用三色法测定外周血T 淋巴细胞CD25百分数水平。取正常人、患者外周血2 mL用 肝素抗凝。取20 Li L抗体加入12 mmX75 mm的塑料小管底 部，每例做2管，1管IgG三色阴性对照，2管 CD8-FITC/CD25FE/CD4-Cychrome；每管加入 50 u L 的抗凝 全血，充分混匀后室温放置20 min,每管再加入2ml溶血素, 充分混合后室温放置10?15 min, 1 000转离心5 min,弃 上清，加2 mL PBS液清洗，再离心，弃上清，加1%多聚甲 醛0. 3mL,上机进行荧光检测，流式细胞仪采集淋巴细胞窗 内5 000个细胞用Cell Quest软件分析阳性标记细胞百分 1. 3统计学方法 采用统计软件包SPSS 11.0分析统计检测结果。 2结果 2. 1正常人与恶性肿瘤患者CD4+CD25+和CD8+CD25+抗 体的表达 正常人和恶性肿瘤患者之间的CD4+CD25+抗体的表达 差异统计学意义（P 0. 05）o详见表1。 2.2几种恶性肿瘤患者CD4+CD25+和CDa+CD25+抗体的 表达 选取例数较多的几种恶性肿瘤，分析它们CD4+CD25+和 CD8+CD25+抗体的表达情况，结果显示，食管癌、肝癌和肺 癌的CD4+CD25+抗体的表达与正常人比较，差异有统计学意 义（P 0. 05）o以上几种恶性肿瘤患者外周血CD8+CD25+抗 体表达与正常人比较，差异无统计学意义（P 0. 05）o详 见表2o 3讨论 Sakaguchi S等［5］于1995年发现未免疫小鼠外周循环 中的CD4+T细胞约10%表达CD25+,将除去了 CD25+的CD4+ 单阳性T细胞过继转给T细胞缺陷小鼠，能导致宿主各种器 官特异性的自身免疫疾病。而将CD4+CD25+和CD4+单阳性T 细胞过继转移，则能防止自身免疫疾病发生，说明 CD4+CD25+T细胞和维持自身免疫耐受有关［6-7］ o恶性肿瘤 的发生及其生长过程中，机体早期对肿瘤处于无反应状态， 这种免疫耐受”可能和CD4+CD25+有关［8-10］ o 从本实验检测的274例恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+ 的数据可以看出其含量明显高于正常人(表1),表明恶性肿 瘤患者机体对肿瘤处于无反应免疫耐受状态和CD4+CD25+细 胞群的增加有关，支持了上述观点。肠癌、胃癌、鼻咽癌的 均值均高于正常人，但是经统计学处理其差异无统计学意 义，可能是因为例数太少，有待今后进一步观察。恶性肿瘤 患者外周血CD8+CD25+水平与正常人没有显著性差异。 综上所述，恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+的测定可作 为恶性肿瘤免疫诊断的参考指标之一，对于临床了解恶性肿 瘤患者的免疫活化和免疫耐受状态有一定的帮助。 ［参考文献］ ［1］杨琨，荣阳，荣根满，等.肿瘤自体CIK细胞免疫 治疗前后T细胞亚群的变化［J］.中华临床医学研究杂志， 2006, 12 (16)：