医学微生物学实验课件.ppt

冲洗 3、使用油镜观察实验结果 四、方法与步骤 1、细菌涂片的制备 涂片 干燥 固定 2、染色 初染（结晶紫） 媒染（卢戈氏碘液） 脱色 （95%乙醇） 复染（稀释石碳酸复红） 吸水纸吸干 1min 1min 30s 30s 冲洗 冲洗 冲洗 一 一 半 半 G+菌 G-菌 结晶紫 卢戈氏碘液 95%乙醇 石碳酸复红 初染 媒染 脱色 复染 五、结果 图一 图二 无菌操作（接种环灭菌和取菌） 涂片的厚度要适中 染色的时间控制，一一半半 冲洗的方法，不要对着涂片区冲洗 六、注意事项 七、意义 1、鉴别细菌 2、研究与致病性 的关系 3、指导临床用药 G+菌 G-菌 G+菌： 外毒素 G-菌： 内毒素 G+菌：青霉素、头孢菌素等 G-菌：链霉素、庆大霉素等 细菌的特殊结构（示教）（二毛荚一胞） 从细胞质的基础颗粒长出，伸到细胞外面的细长呈波状弯曲的丝状物。 功能：鞭毛运动可鉴定、与致病性有关、具有抗原性（H抗原） 比鞭毛更细、短、直、硬、多的丝状蛋白附属物，与运动无关，菌毛中空，可分为普通菌毛和性菌毛 功能：普通菌毛附黏膜，性菌毛传递遗传物质 菌体内部物质缩水（60％） 形成圆或卵圆形小体。 功能：芽胞形态辨细菌， 灭菌标准抗力强。 寻找视野：在使用油镜之前，必须先经低、高倍镜观察，然后将需进一步放大的部分移到视野的中心。 增大光照强度：将聚光器上升到最高位置，光圈开到最大，凹面镜取光。 转高倍镜头、滴加镜油、换油镜头：转动转换器，使高倍镜头离开通光孔，在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢转动油镜，在转换油镜时，从侧面水平注视镜头与玻片的距离，使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。 注：油镜的使用方法 物 镜 工作距离(mm) 低倍镜 10× 5.40 高倍镜 40× 0.39 油镜头 100× 0.11 透镜 折光率 油 1.515 1.0 空气 玻 1.52 璃 空 气 油镜原理示意图 1.通过介绍实验室生物安全方面的相关知 识，树立“有菌的意识，无菌操作的观念” 。 2.掌握革兰染色方法和细菌接种技术。 3.观察细菌的特殊结构。 实验目的 生物危害源 化学危害源 物理危害源 后两者的特性： 1、可感知，易避免 2、危害范围有限 3、危害持续时间短 一.实验室生物安全 医学实验室的主要危害源包括哪些? 惨痛的历史教训 例一：1956年，前苏联的一个实验室曾有9支装有感染了委内瑞拉马脑炎病毒的鼠脑的安瓿被打破。由于没采取必要的措施，结果在几天内造成24名工作人员感染。 一.实验室生物安全 例二：2004年4月，中国疾病预防控制中心科研人员，采用未经论证的非典病毒灭活方法，在不符合防护要求的普通实验室内操作非典感染材料，造成北京、安徽发生非典疫情。 一.实验室生物安全 例三：2010年12月东北农业大学 “羊活体解剖学实验”，共5个班级28人感染布鲁氏菌病。采购人均未要求养殖场出具检疫合格证明，断定未经检验的这4只山羊带有布鲁氏菌。此外，导致此次感染的原因还有:未能切实按照实验规范，严格要求学生遵守操作章程，进行有效防护。 一.实验室生物安全 实验室感染的事件曾多次发生，实验室人员曾为此付出了沉重的代价。这些感染的主要原因是：防护意识不强，操作失误，防护条件不足。 一.实验室生物安全 医学微生物学实验室规则 学生进微生物实验室必须穿好工作服，离室需脱下反折，要经常清洗消毒。 进实验室时随带书包、衣物等与实验无关物品一律存放指定的储物柜内。 严