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中国兽医科学 ， （ ）：
１１１１１７
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ＣｈｉｎｅｓｅＶｅｔｅｒｉｎａｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ
ｙ
中图分类号： 文献标志码： 文章编号： （ ）
Ｓ８５２．６１６．３ Ａ １６７３４６９６２０１３０２０１１１０７
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产气荚膜梭菌ＥＦＴｕ基因的原核表达
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及其多克隆抗体的制备
＊
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解真真 郑晓星 李广兴 张 艳 李兰兰
（ ， ）
东北农业大学动物医学学院 黑龙江哈尔滨 １５００３０
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摘要 通过 ＰＣＲ方法扩增产气荚膜梭菌 ＡＴＣＣ１３１２４株 ＥＦＴｕ基因 利用原核表达载体 ＧＥＸ ６Ｐ１
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构建重组质粒 经双酶切和测序鉴定正确后转化 进行 诱导表达 表达产物
ＧＥＸ ＥＦ Ｅ．ｃｏｌｉＲｏｓｓｅｔａ ＩＰＴＧ
ｐ －
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纯化后免疫大白兔制备多克隆抗体 应用间接 和间接免疫荧光方法对所得抗体进行
ＥＬＩＳＡ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ
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检测 结果显示 经 诱导 后蛋白表达量最高 并且主要以包 涵体 的形式存在 分子 质
１．０ｍｍｏｌＬＩＰＴＧ ５ｈ
。 。 ，
量 为 间接 方法检测 的 多抗血清效价为 结果证实 重组蛋白 与 产
６９ｋｕ ＥＬＩＳＡ １∶２６２１４４ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ
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