高效液相色谱测定乳制品中乳糖和蔗糖.pdfVIP

维普资讯 罴江食品工业 … 第 高 叶 洁 周 云 ● 黻 (浙江省轻工业研 究所 ) 相 色 、 一水1 j前{言 乳制品中的糖 以乳糖和蔗糖为主，其中：瞎含量是乳制品的一个重要质量指标。我国在进 期测 r 1 1 行乳糖和蔗糖测定时，一般应用费林 氏法 此法条件难以控制，试剂耗用量大，实验耗时多 定 现虽有许多介绍用高效液相色谱法测糖，但一般均选用制糖 原 料为样品 “‘“ 或乙腈与水 乳 、 比例混合为流动相， 对高脂高蛋白的乎制品中的乳糖及蔗糖测定，却少有介绍。 瓤 }本法选用Beckmanu--SpherogelCarbohydrate×7．5柱，以水为流动相，柱温70℃， 流速0．2ml／min时，蔗糖和乳糖能得到较好的分离。此法 简 便，快速，试剂耗用少，精密 度高。在量程 x16时，50 g／ml~5mg／ml范围内，其浓度与 峰 面积呈线性关系，其相关 系数分别为0．9989、0．9995。本法回收率在96~106 ，变异系数 分别为1．90、1．11。经与 费林氏法对照，证明此法可用于乳制品中乳：睹和蔗糖测定。 2 实验部分 2．1试剂 2．1．1标准溶液的制各：称已干燥至恒 重的蔗糖、乳糖各O．5ooo~，~ lOOml。此 标准溶液浓度为5mg／m!。 2．1．220 醋酸铅溶液：称取20克醋酸 ％ 溶于lOOml水中。 ● 2．1．3草酸钾一磷酸氢二钠溶液：取草酸钾 3克 磷酸氢二钠 7克，溶于1OOml水中。 2．2色谱条件 ● 2．2．1色谱柱 --SpherogelCarbohydrate×7．5 2． 2l流动相．．水 2．2．3流速：0．2ml／min 2．2．4进样量l20ul 2．2．5柱温I70℃ 2．2．B检泓器lBeckman 156Refrac：iVeIndex Detector,量程 ×16 注：本实验所用试剂均为分析纯，所用 均为重蒸水。 ·52 · 维普资讯 浙江食品工业 第5卷 第 l期 1993丰 2．3样品预处理 取一定量样品，用 温水溶解．转移蔓一适当的容量瓶 内，加过量的20％醋馥铅溶液使蛋 白质沉淀完全，再加草酸钾一磷酸氢二钠溶液 {冗淀过量的铅离子，定容，摇匀。过O．d5¨m 滤膜，收集1ml滤液做进样用。 3 结果 与讨论 3．1分离条件的选择 ● 图 1 同流动相下的色谱 日 0一蔗糖 圆一拈艚 ● ， ， “ Ⅱ I I