基于免疫传感器对β-受体激动剂类兽药残留的快速现场检测研究-食品科学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 独 创 性 声 明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工 作及取得研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方 外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得 宁波大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作 的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了 谢意。 若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。 签名： 日期： 关于论文使用授权的声明 本人完全了解宁波大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校 有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论 文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 （保密的论文在解密后应遵循此规定） 签名： 导师签名： 日期： 宁波大学硕士学位论文 基于免疫传感器对β-受体激动剂类兽药残留的快速现场检测研 究 摘 要 本 论 文 制 备 了 一 系 列 用 于 模 拟 生 物 探 针 的 主 客 体 吸 附 材 料 ， 在 此 基 础 上 结 合 夹 心 免 疫 分 析 方 法 ， 开 发 了 多 种 低 成 本 、 简 单 、 高 灵 敏 、 高 特 异 性 的 免 疫 分 析 方 法 ， 实 现 了 对 莱 克 多 巴 胺 （ Ractopamine， RAC） 的 高 灵 敏 痕 量 检 测 ， 具 体 如下：利用胶体铂的生物相容性合成 PtNPs-PV 作为信号探针，通过 PtNPs 标 记 PV（ PowerVision ） 来 代 替 传 统 试 剂 盒 的 酶 标 抗 体 ， 共 同 催 化 底 物 二 氨 基 联 苯胺（ 3,3’-diaminobenzidine， DAB） 产 生 颜 色 反 应 ， 以 达 到 双 重 放 大 效 果 ， 构 建光化学免疫传感器 ，实现食品中 RAC 痕量残留的快速、灵 敏、高特异性检 测 。 合 成 磁 性 β- 环 糊 精 （ β-cyclodextrin ， β-CD ） 代 替 抗 体 捕 获 样 品 中 的 目 标 物，再结合 PtNPs-PV 双重信号放大效应，通过夹心免疫光 化学分析的方法完 成 RAC 的 检 测 ， 该 方 法 避 免 了 竞 争 型 免 疫 分 析 易 发 生 假 阳 性 的 缺 点 。 合 成 磁 性 β-CD 代 替 抗 体 作 为 捕 获 探 针 ， 胶 体 金 富 集 辣 根 过 氧 化 物 酶 （ Horseradish Peroxidase，HRP）合成 enzyme-AuNPs 作 为信 号 探针，用 3,3,5,5-四 甲 基联 苯 胺二盐酸 （ TMB） 为 底 物 放 大 信 号 ， 基 于 TMB 沉淀和 RAC 的质量之间的比 例 关 系 ， 通 过 运 用 石 英 晶 体 微 天 平 （ Quartz Crystal Microbalance ， QCM） 测量 enzyme-AuNPs 复 合 物 催 化 TMB 沉 淀 的 数 量 ， 可 以 实 现 RAC 的量化。以酶 - 抗体的共轭聚合物 PV 试 剂 作 为 信 号 标 签 ， Fe3O4@β-CD 磁 性 纳 米 颗 粒 作 为 RAC 的 捕 获 探 针 ， 以 TMB 作 为 底 物 放 大 反 应 信 号 合 成 了 一 种 免 修 饰 QCM 免疫传感器来检测饲 料中微量的 RAC 残留 。 上 述 分 析 方 法 大 大 降低了实验成 本，简化了实验步骤 ，增强了检测灵敏度 ，为 RAC 的 现 场 检 测 提 供 了 理 论 依 据。 本论文主 要从下 述 4个方面开 展研究 工作 ： 1. 基于 PtNPs-PV 的 双 重放 大免 疫比 色法检 测肉 中 RAC 痕 量残 留的 研究 提出了一 种免疫 比色 方法用于 检测食 品中 RAC 的残留 。该方 法结合了 抗原 抗 体 特 异 性 结 合 的 高 选 择 性 特 点 和 胶 体 铂 颗 粒 与 多 聚 酶 螯 合 物 （ PtNPs-PV）的 信 号 放 大 效 应 ， 能 特 异 、 灵 敏 地 检 测 样 品 中 痕 量 的 RAC 残 留 。 多 聚 酶 螯 合 物 I 基于免疫传感器对β-受体激动剂类兽药残留的快速现场检测研究 PV 上含 有抗 抗 体和 大量 的 HRP 酶 ，与 抗体 特异 结 合的 同时 催化 底物 DAB 产 生 显 色 沉 淀 ， 并 且 胶 体 铂 颗 粒 （ PtNPs） 也 能 催 化 DAB 产 生 显 色 复 合 物 ， 从 而 达 到 双 重 放 大 效 果 。 通 过 测 定 DAB 反 应 产 物 吸 光 度 的 变 化 能 对