猪髓样细胞触发因子1 CDR 区的克隆、表达及生物活性.pdfVIP

江苏农业学报（ＪｉａｎｇｓｕＪ．ｏｆ Ａｇｒ．Ｓｃｉ．），２０１６，３２（５）：１１００～１１０６ １１００ ｈｔｔｐ：／ ／ ｗｗｗ．ｊｓｎｙｘｂ．ｃｏｍ 李　 辉，果双双，孟春花，等． 猪髓样细胞触发因子 １ ＣＤＲ 区的克隆、表达及生物活性［Ｊ］．江苏农业学报，２０１６，３２（５）： １１００⁃１１０６． ｄｏｉ：１０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１０００⁃４４４０．２０１６．０５．０２３ 猪髓样细胞触发因子 １ ＣＤＲ 区的克隆、表达及生物 活性 １ ２ １ ３ １ 李　 辉 ，　 果双双 ，　 孟春花 ，　 周亚文 ，　 施振旦 （１． 江苏省农业科学院畜牧研究所，江苏 南京 ２１００１４； ２． 山东农业大学动物科技学院，山东 泰安 ２７１０１８； ３． 青岛职业技 术学院，山东 青岛 ２６６５５５） 　 　 摘要：　 本研究旨在探讨重组猪ＴＲＥＭ⁃１基因ＣＤＲ区蛋白对猪肺泡巨噬细胞受到脂多糖（ＬＰＳ）刺激后炎症因 子表达状态的改变。 首先克隆猪ＴＲＥＭ⁃１基因ＣＤＲ区，然后构建重组载体并转入ＢＬ２１（ＤＥ３）中，ＩＰＴＧ诱导表达、 纯化并复性猪ＴＲＥＭ⁃１基因ＣＤＲ蛋白。 将不同浓度复性的重组蛋白添加到１０００ ｎｇ／ ｍｌ ＬＰＳ处理的猪肺泡巨噬细 胞培养液中，然后通过荧光定量 ＰＣＲ方法分别测定主要促炎症因子（ＩＬ⁃１β、ＩＬ⁃２、ＩＬ⁃４、ＩＬ⁃６、ＩＬ⁃８、ＩＬ⁃１０、ＩＬ⁃１２、ＩＬ⁃ １６、ＩＬ⁃１８及ＴＮＦα）的表达规律。 结果显示，重组猪ＴＲＥＭ⁃１ＣＤＲ区蛋白可显著降低由ＬＰＳ诱导的主要促炎症因子 的表达。 表明重组猪ＴＲＥＭ⁃１基因ＣＤＲ区蛋白具有抑制炎症反应的生物学活性。 关键词：　 猪； 髓样细胞触发因子 １； 肺泡巨噬细胞； 促炎症因子 中图分类号：　 Ｓ８２８　 　 　 文献标识码：　 Ａ　 　 　 文章编号：　 １０００⁃４４４０（２０１６）０５⁃１１００⁃０７ Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＣＤＲ ａｒｅａ ｆｒｏｍ ｓｗｉｎｅ ｔｒｉｇｇｅｒｉｎｇ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｏｎ ｍｙｅｌｏｉｄ ｃｅｌｌｓ １ ａｎｄ ｉｔｓ ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙ １ ２ １ ３ １ ＬＩ Ｈｕｉ ，　 ＧＵＯ Ｓｈｕａｎｇ⁃ｓｈｕａｎｇ ，　 ＭＥＮＧ Ｃｈｕｎ⁃ｈｕａ ，　 ＺＨＯＵ Ｙａ⁃ｗｅｎ ，　 ＳＨＩ Ｚｈｅｎ⁃ｄａｎ （１． Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＪｉａｎｇｓｕＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００１４，Ｃｈｉｎａ； ２． Ｃｏｌｌｅｇｅｏｆ ＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄ ＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ， Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉａｎ ２７１０１８，Ｃｈｉｎａ； ３． Ｑｉｎｇｄａｏ Ｐｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６５５５，Ｃｈｉｎａ） 　 　 Ａｂｓｔｒａｃｔ：　 Ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｔ ｓｔｕｄｙ，ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｉｎ ｌｉｐｏｐｏ⁃ ｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ （ＬＰＳ）⁃ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ ｐｏｒｃｉｎｅ ａｌｖｅｏｌａｒ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ ｂｙ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＴＲＥＭ⁃１ＣＤＲ ｐｒｏｔｅｉｎ． Ｓｗｉｎｅ ＴＲＥＭ⁃１ＣＤＲ ａｒｅａ ｗａｓｃｌｏｎｅｄａｎｄｉｎｓｅｒｔｅｄｉｎｔｏｐｒｏ