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深 层 发 酵
diblefungi 2017(5)
柳生金针菇发酵培养条件优化及菌丝体多糖提取工艺
彭 璐 杨健华 王 巍 王 琦*
(吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心,吉林长春 130118)
摘 要 为提高柳生金针菇多糖产量,通过装液量、接 省稻城县香格里拉乡亚丁村(地理坐标:100°16′E,
种量、培养温度和培养箱转速单因素实验及正交优化试 28°13′N)的柳生金针菇子实体(编号:T23093)。菌
验,对其发酵培养条件进行优化。选取浸提时间、浸提 种保藏于食药用菌教育部工程研究中心菌种库。
温度及液料比3个因素,以菌丝体多糖提取率为指标,采
1.2 培养基 (1)平板培养基(PDA综合培养基):
用正交试验设计确定多糖提取的最佳工艺。结果表明,
马铃薯200 g,葡萄糖 20 g,KHPO 1.5 g,MgSO2 4 4
适宜柳生金针菇深层发酵的培养条件为 :装液量
[5]
0.75g,VB 0.1g、琼脂20g,水1L,pH 自然 。(2)液1
120mL/250mL、接种量10%、培养温度23℃、培养箱转速
150r/min。菌丝体多糖提取的最佳工艺条件为:浸提时 体种子培养基:马铃薯200g,葡萄糖20g,蛋白胨2g,
间2h,液料比50∶1,浸提温度90℃,最佳工艺路线为:热 酵母浸粉2g,KHPO 1.5g,MgSO 0.75g,VB 10mg、2 4 4 1
[6]
水浸提2h,过滤,合并3次提取液,旋转蒸发仪浓缩发酵 水1L,pH 自然 。(3)液体培养基:葡萄糖20g,蛋白
液至原体积的 1/10,4倍体积无水乙醇4℃醇沉24 h, 胨 2 g,酵母浸粉2 g,KHPO 1.5 g,MgSO 0.75 g,2 4 4
3500r/min离心5min,去上清,-80℃预冻过夜,真空冷冻 [7,8]
VB 10mg,水1L,pH自然 。1
干燥,称重,再次溶解多糖,离心去沉淀,上清液醇沉,再 1.3 试验方法
次干燥,得菌丝体多糖,多糖提取率为74.39%。 1.3.1 柳生金针菇菌种ITS鉴定 采用CTAB法提
关键词 柳生金针菇 发酵 多糖 提取率
取柳生金针菇菌丝rDNA并进行琼脂糖凝胶电泳检
文章编号 1000-8357(2017)05-0024-04
测同时对所提取的DNA进行PCR扩增,引物序列为
柳生金针菇(Flammulinarossica)隶属担子菌 ITS1(5’
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