大豆耐盐相关基因GmNcl1功能标记的开发及验证.pdfVIP

江苏农业学报(ＪｉａｎｇｓｕＪ.ｏｆ Ａｇｒ.Ｓｃｉ.),２０１７,３３(６):１２２７~１２３４ ｈｔｔｐ:/ / ｗｗｗ.ｊｓｎｙｘｂ.ｃｏｍ １２２７ 宁丽华,何晓兰,张大勇. 大豆耐盐相关基因ＧｍＮｃｌ１功能标记的开发及验证[Ｊ].江苏农业学报,２０１７,３３(６):１２２７-１２３４. ｄｏｉ:１０.３９６９/ ｊ.ｉｓｓｎ.１０００-４４４０.２０１７.０６.００５ 大豆耐盐相关基因ＧｍＮｃｌ１ 功能标记的开发及验证 宁丽华, 何晓兰, 张大勇 (江苏省农业科学院种质资源与生物技术研究所/ 江苏省农业生物学重点实验室,江苏 南京 ２１００１４) 摘要: 土壤盐渍化严重影响大豆生产,因而鉴定大豆耐盐种质的分子标记对大豆耐盐新品种的培育具有重 要意义. 本研究分析了大豆耐盐相关基因ＧｍＮｃｌ１等位变异位点的限制性酶切位点,通过酶切ＰＣＲ产物,琼脂糖 凝胶电泳和酶切片段分析,开发建立了分子标记ＣＡＰＳ/ Ｘｂａ Ｉ. 利用该标记对 １０份不同耐盐大豆种质进行酶切分 型鉴定,然后通过测序试验进行验证. 结果表明,用所开发的共显性标记ＣＡＰＳ/ ＸｂａＩ对１０份大豆种质进行耐盐性 鉴定,鉴定结果与依据表型进行鉴定的结果一致. 由此可见,ＣＡＰＳ/ ＸｂａＩ可用于大豆品种的耐盐性鉴定. 关键词: 大豆; 耐盐性; ＧｍＮｃｌ１; 酶切扩增多态性序列(ＣＡＰＳ)标记 中图分类号: Ｓ５６５.１ 文献标识码: Ａ 文章编号: １０００-４４４０(２０１７)０６-１２２７-０８ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｍａｒｋｅｒ ｏｆ ｓｏｙｂｅａｎ ｓａｌｔ ｔｏｌｅｒ- ａｎｃｅ ｇｅｎｅ ＧｍＮｃｌ１ ＮＩＮＧ Ｌｉ-ｈｕａ, ＨＥ Ｘｉａｏ-ｌａｎ, ＺＨＡＮＧ Ｄａ-ｙｏｎｇ (Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ, Ｊｉａｎｇｓｕ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ/ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ａｇｒｏｂｉｏｌｏｇｙ, Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００１４,Ｃｈｉｎａ) Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｓｏｉｌ ｓａｌｉｎｉｚａｔｉｏｎｗｉｌｌｌｅａｄｔｏｓｅｒｉｏｕｓｒｅｄｕｃｔｉｏｎｏｆｙｉｅｌｄａｎｄａｆｆｅｃｔｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆ ｓｏｙｂｅａｎ.Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ,ｉｄｅｎｔｉｆ- ｙｉｎｇ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍａｒｋｅｒｓｌｉｎｋｅｄｔｏｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎ ｇｅｎｅｏｆ ｓａｌｔ ｔｏｌｅｒａｎｃｅｗｉｌｌ ｂｅｈｅｌｐｆｕｌ ｔｏ ｓｏｙｂｅａｎｂｒｅｅｄｉｎｇ. Ｏｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆ ｔｈｅ ａｌｌｅｌｉｃｖａｒｉａｔｉｏｎｓｏｆ ＧｍＮｃｌ１,ｗｈｉｃｈｗａｓａｓａｌｔｔｏｌｅｒａｎｃｅｇｅｎｅ,ａｐａｉｒ ｏｆ ｐｒｉｍｅｒｓｗａｓｄｅｓｉｇｎｅｄ,ａｎｄｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆ ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｍａｒｋｅｒ. Ｆｉｎａｌｌｙ,ａ ｃｌｅａｖｅｄ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ(ＣＡＰＳ) ｍａｒｋｅｒ ｎａｍｅｄ ＣＡＰＳ/ ＸｂａＩ ｗａｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ. Ｔｅｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓａｌｔｔｏｌｅｒａｎｃｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｓｏｙｂｅａｎｃｕｌｔｉｖａｒｓｈａｖｅｂｅｅｎ ｓｃｒｅｅｎｅｄｂｙｔｈｉｓｍａｒｋｅｒ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｓａｌｔ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｓｏｙｂｅａｎ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｃｏｄｏｍｉｎａｎｔ ｍａｒｋｅｒ ｗａｓ ｃｏｎｓｉｓｔｅｄｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｔｈａｔ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｃ- ｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ. Ｓｏ,ＣＡＰＳ/ ＸｂａＩ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｙｂｅａｎ ｓａｌｔ