寒地冬小麦抗氧化指标低温响应及GST基因的差异表达分析-作物学;作物遗传育种专业论文.docxVIP

Classified Classified Index： Code：10224 Confidential(yes／no)：no NO．：120310191 Dissertation for the Master Degree The Cold Response of Some Antioxidant Relative Traits an d Differential Expression Analysis of GST Genes in Cold Winter Wheat at Low Temperature Candidate：Sun Rui Supervisor：Professor Li Zhuofu Degree Category：Master of Agriculture College：Agricultural College First level discipline：Crop Science Second level discipline：Crop Genetics and Breeding Harbin China June 2015 万方数据 目录目 目录 目 录 摘要 ． ． ．I 英文摘要 j III 1前言 。1 1．1植物抗寒性研究进展 l 1．1．1低温对植物的伤害 l 1．1．2细胞膜系统与植物抗寒性的关系 ．1 1．1．3抗氧化系统与植物抗寒性的关系 ．2 1．2抗寒性相关基因的研究进展 4 1．2．1抗氧化酶基因的研究进展 4 1．2．2谷胱甘肽转移酶基因 5 1．3实时荧光定量RT-PCR技术的发展与应用 ．6 1．4黑龙江冬小麦抗寒性研究进展 6 1．4．1寒地冬小麦育种的研究进展 ．6 1．4．2低温下寒地冬小麦的生理生化特性 ．7 1．4．3冬小麦抗寒基因研究进展 ．8 1．5研究目的与意义 8 2材料与方法 ．1 0 2．1试验材料与试验设计 ．．10 2．1．1寒地冬小麦抗氧化生理指标的比较分析试验 10 2．1．2低温下谷胱甘肽转移酶相关基因表达分析试验 11 2．2试验所用药品 ．．11 2．2．1低温下寒地冬小麦抗氧化生理指标的比较分析试验 11 2．2．2与谷胱甘肽转移酶相关基因表达分析试验 一11 2．3试验仪器 ～1 2 2．4抗氧化相关性状测定 一13 2．4．I相对电导率和丙二醛含量的测定 一13 2．4．1．1相对电导率的测定 13 2．4．1．2丙二醛含量的测定 13 2．4．2抗氧化酶活性的测定 。13 2．4．2．1超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 13 2．4．2．2过氧化物酶活性(POD)的测定 14 2．4．3抗氧化剂含量的测定 一1 4 2．4．3．1还原型谷胱甘肽(GSH)含量的测定 14 2．4．3．2抗坏血酸(ASA)含量的测定 15 万方数据 东北农业大学农学硕士学位论文2．4．4荧光定量RT-PCR的相关试验 东北农业大学农学硕士学位论文 2．4．4荧光定量RT-PCR的相关试验 1 5 2．4．4．1 RNA的提取与检测 1 5 2．4．4．2荧光定量的引物 16 2．4．4．3反转录过程 17 2．4．4．4梯度PCR和退火温度的确定 17 2．4．4．5荧光定量PCR反应 l 7 2．5试验数据处理 一1 8 3结果与分析 ．19 3．1低温下寒地冬小麦品种间相对电导率的比较分析 ．．19 3．2低温处理下品种间丙二醛(MDA)含量的比较分析 ．．20 3．3品种间超氧化物歧化酶(SOD)活性比较分析 21 3．4不同品种间过氧化物酶(POD)活性的比较分析 22 3．5不同品种间还原型谷胱甘肽(6SH)含量的比较分析 22 3．6品种间抗坏血酸(ASA)含量的比较分析 23 3．7谷胱甘肽转移酶相关基因的荧光定量分析 一24 3．8品种间GST基因表达量的比较分析 ．29 3．9室内模拟低温环境下还原型谷胱甘肽(GSH)的含量分析 一29 3．10室内模拟低温环境下GSH含量与谷胱甘肽转移酶基因间的相关性分析 35 4讨论 36 4．1低温下寒地冬小麦品种间相对电导率与丙二醛(MDA)含量的变化 ．36 4．2低温下寒地冬小麦品种间抗氧化酶活性变化 一36 4．3低温下寒地冬小麦品种间抗氧化剂含量的变化 ．．37 4．4低温下冬小麦MDA含量与抗氧化酶活性变化的关系 37 4．5低温下冬小麦中GSH含量变化与抗氧化代谢的关系 38 4．6低温处理下寒地冬小麦GSTS基因表达量的变化 38 4．7寒地冬小麦GST基因表达与GSH含量的关系 39 5结论 4l 致谢 42 参考文献 43 攻读硕士学位期间发表的学术论文 50 II 万方数据 CONTENTSCoNTENTS CONTENTS CoNTENTS Abstract