光敏色素B调控的锌指蛋白基因OsTZF1在水稻生长发育中作用的初探-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

山东理工大学硕士学位论文摘 山东理工大学硕士学位论文 摘 要 万方数据 万方数据 摘 要 本课题利用基因芯片技术比较了野生型（Wild type，WT）和 phyB 突变体水稻受 连续红光照射后的基因表达图谱，并且从中筛选到一个受 phyB 介导的红光抑制的 CCCH 型锌指蛋白基因，生物信息学分析表明，该基因编码植物特有的 TZF 蛋白家 族的基因，命名为 OsTZF1（Oryza sativa tandem zinc finger 1）。 为了揭示 OsTZF1 基因在水稻生长发育中的作用，本研究首先对该基因编码产物 的亚细胞定位和基因表达模式进行了分析。利用水稻原生质体瞬时表达体系分析 OsTZF1 蛋白质定位结果显示，OsTZF1 蛋白定位于细胞质中。通过比较不同光照条 件下 OsTZF1 基因在野生型和光敏色素突变体中的表达水平，我们发现红光对 OsTZF1 基因的抑制是由 PHYB 调控的，与 PHYA 无关。通过 OsTZF1 基因的表达器官特异 性分析，该基因在水稻的茎和叶中表达量最高，而在胚中表达量最低，据此推测 OsTZF1 基因在不同器官中作用可能不同。而通过对不同激素的应答反应进行分析， 表明水稻 OsTZF1 基因的表达受外源脱落酸（ABA）的诱导，并受茉莉酸（JA）的抑 制。 为了进一步了解 OsTZF1 基因的功能，本文对该基因的过量表达株系的光形态建 成特征及对非生物胁迫抗性进行了详细分析。结果表明在表型上 OsTZF1 蛋白可以影 响水稻叶片与叶鞘之间的夹角。并且就抑制胚芽鞘生长而言，OsTZF1 基因过表达水 稻株系对红光更为敏感，表明 OsTZF1 基因参与水稻的光形态建成。进一步通过对 ABA 和 JA 处理后的 WT 和过量表达株系进行表型分析发现，OsTZF1 基因可以影响 水稻 ABA 代谢途径和应答途径，但可能不会参与 JA 相关的信号途径。此外 OsTZF1 基因在水稻耐盐反应中具有重要作用。 另外，在本研究中我们还培育了 OsTZF1 基因的 RNAi 植株，为进一步分析 OsTZF1 基因在 phyB 介导的光反应和水稻生长发育中的作用奠定了基础。 关键词：水稻；光敏色素；锌指蛋白；OsTZF1 基因；基因表达模式；功能分析。 I 山东理工大学硕士学位论文Ab 山东理工大学硕士学位论文 Abstract Abstract In the previous work, gene profiles were compared between wild-type (WT) and PHYB mutants grown under continuous red light (R) in the GeneChip. One candidate gene encoding CCCH-type zinc finger protein was identified to be down-regulated by phytochrome B （phyB）-mediated R signal. Bioinformatics analyses revealed that the protein encoded by this candidate gene contains plant-unique TZF (tandem zinc finger) motifs. Thus this gene was named as OsTZF1 (Oryza sativa tandem zinc finger 1). To access the biological functions of OsTZF1 gene in rice growth and development, the subcellular localization and expression pattern of OsTZF1 were analyzed. OsTZF1 protein was found to localize to the cytoplasm using a rice protoplast transient expression system. By comparing the transcript levels of OsTZF1 in WT and phytochrome mutants grown in different light conditions, it was found that OsTZF1 expression was repressed by phyB-mediated R signaling and not phyA-mediated R signaling. Organ-spec