含丝蛋白肝脏组织工程支架材料的制备及体外评价-生物医学工程专业论文.docxVIP

摘要 摘要 万方数据 万方数据 摘 要 各类肝病引发的肝功能衰竭已严重影响人类健康。虽然肝脏组织工程技术是当今 最具潜力的治疗手段，但是寻找理想的支架材料一直是该领域的技术难题。家蚕丝胶 蛋白(silk siricin, SS)是一种宝贵的天然高分子材料，是人类利用很早的动物蛋白质之 一，在丝绸工业中，产生的大量丝胶常作为废物随废水直接排放，对其开发利用可节 约资源、保护环境。作为天然蛋白，丝胶具备特异性分子识别信号，可促进细胞粘附 和增殖，诱导细胞分化及为其提供支架。基于丝胶良好的凝胶化性能、低免疫原性， 特殊的生物相容性和可降解性等，逐渐在组织工程支架等医学领域得到了广泛的重视 和研究。但是丝胶在低温冷冻时为凝胶，加热到室温左右即成为溶胶，调控较为困难， 对其改性调制必不可少。当前报道较多的壳聚糖/甘油磷酸钠(CS/GP) 温敏性复合凝 胶材料，具有低温溶胶，体温范围内呈凝胶状态的特点，可作为对丝胶的改性物质之 一。同时，玉米淀粉(Maize Starth, MS)是一类可完全生物降解的多糖类天然高分子， 来源广泛、价格低廉；聚乙烯醇(Polyvinyl Alcohol, PVA)具有优良成膜性、力学性能， 以及良好的亲水性、生物相容性和降解性，二者均可作为安全医用生物材料用于对丝 胶性质的完善。 本课题分为两个大部分，先后尝试制备了溶胶状态经注射后可在体内成型和直接 在体外成型两类可调控型肝脏组织工程支架材料，即 SS/CS/GP 温敏性复合凝胶和 SS/PVA/MS 凝胶膜，从结构、性能及应用方面，分析了二者用于肝脏组织工程支架 的可行性。首先进行了对 SS/CS/GP 温敏性复合凝胶的研究，即将废弃蚕茧中提取的 丝胶蛋白(SS)，外加高脱乙酰度的壳聚糖(CS)、α、β-甘油磷酸钠(GP)，三者经冰浴下 的特定方式混合，得到不同配比 SS/CS/GP 复合物，该复合物可在 20℃以下长时间保 持液态，在体温环境(37±5℃)附近、大范围生理 pH 值 (6.9-7.45)下，快速凝胶化；对 其结构性能研究显示 SS/CS/GP 凝胶具备贯通的三维多孔结构、适当的力学强度、良 好的生物降解性且降解速率可调控，无细胞毒性且具备一定的促 BRL 大鼠肝细胞生 长性能，并可通过注射实现体内成型。然后进行了 SS/PVA/MS 凝胶膜材料的研究， 即将废弃蚕茧中提取的 SS，与 MS 和 PVA 经水相共混和反复冻融可实现体外不同配 比的 SS/PVA/MS 凝胶膜材料成型。研究其力学性能和降解机制表明，SS/PVA 质量比 为 3/7，MS 添加量为 18%时，凝胶膜整体力学性能最优，不同配比 SS/PVA/MS 凝胶 膜均具备降解性，且降解速率可通过 SS/PVA 比例及 MS 含量得到调控，该凝胶膜材 料通过体外成型且具备可调控的降解性能，有望作为体外肝脏组织工程支架使用。 关键字：丝胶蛋白；玉米淀粉；壳聚糖；可注射；温敏性凝胶；降解性能；细胞毒性 I Abstract All kinds of liver disease have serious impact on human health, the liver tissue engineering technology is the most potential treatment, but looking for the appropriate scaffold materials has been always a technical problems of this field. Silk sericin (SS) is a precious natural polymer which was used for a long time. The development and utilization of SS not only can save enviroment, but protect enviroment for it was always discharged as a waster in silk industry. Because of its specific molecular recognition signal , sericin can promote cell adhesion and proliferation , induce cell differentiation and provide a scaffold。 Sericin has received widely attention and studied with its well gel properties, low immunogenicity, special