广西水稻纹枯病菌的遗传差异研究-作物栽培学与耕作学专业论文.docxVIP

化，其它几个菌系的致病力均比较弱，致病力强弱顺序为尼solani 化，其它几个菌系的致病力均比较弱，致病力强弱顺序为尼solani AGI-IA 尼oryzae尼oryzae-sativae曼hydrophi／urn,此外，通过几种病 原菌鉴定方法的比较，结果表明rDNA的PCR-RFLP是分析丝核菌不同菌系极 为有用的技术手段，其结果与病原菌的形态学分类、菌丝融合测定、rDNA序 列分析等的研究结果可以相互验证。 2、从病原菌的生物学特性和rep-PCR指纹图谱等多方面比较了几种不同 丝核菌的遗传差异，结果表明不同茵系在其菌落形态、生长适温、最适pH 值以及对不同培养基营养元素的利用等生物学特性上均存在一定的差异；同 一菌系内菌株间的rep—PCR指纹基本相似，而不同菌系间的差异非常明显， 每种菌系均有多条各自的特征性谱带，可作为鉴别丝核菌不同菌系的特异性 标记。 3、分析和比较了5个不同菌系的ITSl-5．8S-ITS2问的核苷酸序列，并 构建了它们之间的系统发育树。根据不同菌系rDNA ITS区序列的差异，设计 了一对可专化性检测水稻枯斑丝核菌(尼oryzae)的特异性引物 WP-1R／WP-2F，同时还设计了一条嗜水小核菌(曼hydrophilum)的专化性引 物SP-1F，该引物与通用引物ITSl配对，可对爱hydrophi／urn进行特异性 扩增。进一步的研究结果还表明引物WP-1R／1／P-2F与SP-1F／ITSl能够分别准 确地检测到罹病植株中的尼oryzae和hydrophiIurn,可以分别地用于对 这两种病原菌引起的病害进行早期、快速诊断。 4、尼solani AGl一IA菌系内的存在明显的致病力分化和一定的遗传变 异潜能。致病力测定结果表明145个足solani AGI-IA菌株对供试水稻品种 的平均病情指数为37．3’78．3，大多数表现强致病性，少数菌株致病力比较 弱。尼solani AGI-IA全部供试菌的28S扩增结果分别得到了3种不同的产 箱 物类型，扩增片段类型与菌株的地理来源有一定的相关性，初步推测这种相 物类型，扩增片段类型与菌株的地理来源有一定的相关性，初步推测这种相 关性可能是因为一些菌株细胞中存在不同核型的细胞核所导致。该结果暗示 了尼solaniAGl一IA存在许多遗传变异的潜能，因为由于这种异核体引起的 准性生殖会使菌株的遗传极不稳定，并最终引起菌株的遗传分化。 5、根据rDNA ITS区以及28S的序列分析结果，构建了嗜水小核菌(￡ hydrophilum)的系统发育树，结果表明该菌在rDNA的系统发育上与许多丝 核菌属(Rhizoctonia)真菌有着非常高的同源性。结合该菌在形态上与 Rhizoctonia比较相似的特点，初步推测该菌在分类上应属于丝核菌属 (Rhizoctonia)真菌的一个种，而不是菌核属(Sclerotium)真菌。 6、初步分析了“稻纹枯菌一寄主”互作后，再分离菌株在表型和致病性、 生理生化等基础物质以及DNA水平上的遗传分化。结果表明，与起始菌株相 比，再分离菌株在蛋白酶活性等基础物质上产生了一定的差异，少数再分离 菌株还与起始菌株及其它菌株产生了菌体不亲合现象，即产生了自身不亲和 突变体。进一步的AFLP分析结果表明，所有再分离菌均较起始菌株在DNA 水平上发生了一定程度的改变，揭示了寄主的定向选择作用可能是稻纹枯菌 发生遗传分化的主要原因，稻纹枯菌与不同水稻品种互作之后可产生寄主专 化型不亲和VCGs。该研究结果可为采用多种抗性品种并进行合理时空布局来 控制水稻纹枯病为害提供一定的理论依据。 关键词：水稻纹枯病菌遗传差异病原菌一寄主互作系统发育 STUDlES STUDlES 0N GENETIC DIFFERENTIATl0N 0F THE PATHOGENS CAUSlNG RICE SHEATH BLIGHT lN GUANGXI ABSTRACT Rice sheath bligilt is a destructive disease of rice woridwideand the disease has become one of the major constraints for rice productivity and yield stability of rice in recent years．It is very difficult t0 control the disease because of the diversity and variability of the pathogen．In order to clarify the genetic mutations and diversity of t