补骨脂抗氧化、抑制α葡萄糖苷酶与抗菌活性成分探究.docxVIP

补骨脂抗氧化、抑制Q—葡萄糖昔酶与抗菌 活性成分探究 ［摘要］从补骨脂中分离得到12个化合物，分别为 异补骨脂素(1),补骨脂素(2), 8-甲氧基补骨脂素(3), 补骨脂定(4),补骨脂宁(5),补骨脂甲素(6),大豆昔元 (7),补骨脂乙素(8),补骨脂二氢黄酮甲瞇(9),新补骨 脂素异黄酮(10),大豆昔(11)和紫云英昔(12)。采用体 外清除DPPH和ABTS自由基以及a-葡萄糖昔酶抑制活性对 化合物1?4, 6, 7, 11, 12抗氧化和a-葡萄糖昔酶抑制活 性进行筛选，利用K-B法筛选化合物5, 8?10的抗菌活性。 结果显示，补骨脂定具有清除DPPH自由基的能力(IC50 43. 85 mg ?L-1)；补骨脂定，补骨脂甲素，大豆昔,大豆昔 元和紫云英昔具有清除ABTS自由基的能力(IC50分别为 1. 32, 4. 97, 10. 47, 34. 22, 31.27 mg - L-1)；补骨脂定， 补骨脂甲素和大豆昔元显示出强的a-葡萄糖昔酶抑制活性 (IC50 分别为 40. 74, 45.73, 49.44 mg - L-1)；补骨脂乙 素和新补骨脂异黄酮均有明显的抑制SA, MRSA, ESBLs-SA 的作用(MIC 分别为 0. 781 3,1. 562 5,0. 781 25 ug ? disc-1 和 6. 25, 6. 25, 6. 25 u g ? disc-1 )o ［关键词］补骨脂；活性成分；抗氧化；a-葡萄糖昔酶; 抗菌 补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia Linn. 的果实，又名破故纸、黑故子等，为传统中药，具有温肾助 阳、固精缩尿、温脾止泻、纳气平喘之功效，临床应用广泛 ［1］。现代研究证明，补骨脂含有香豆素类、黄酮类、单菇 酚类等多种化合物：2-3］,具有免疫调节、抗炎、抗氧化、 抗肿瘤等多种功效［4-5］ o郭江宁等［6-7］采用脂类氧化稳定 性快速自动测定仪（0SI）测定了补骨脂及补骨脂石油酉迷和 氯仿部位具有强的抗猪油自动氧化的能力，并从石油瞇部位 分离得到的补骨脂酚和从氯仿部位分离得到的补骨脂甲素、 补骨脂宁和补骨脂定均具有强的抗猪油自动氧化的能力，而 该部位分离的补骨脂素和异补骨脂素无此活性。朱兆荣等［8］ 发现补骨脂总黄酮可提高SOD的活力，并对免疫器官有一定 的影响。常艳旭等［9］采用高效液相-二极管阵列检测器-1, 1-二苯基-2-苦基腓在线检测的方法发现补骨脂酚为其主要 抗氧化活性成分。Yin S等［10］发现补骨脂中的补骨脂二氢 黄酮甲瞇有较强的抗金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌作用； 新补骨脂异黄酮能抑制新型隐球菌、烟曲霉和金葡菌。本文 对补骨脂中分离得到化合物的抗氧化活性、a-葡萄糖昔酶 抑制活性及抑菌活性进行研究，研究结果具有一定创新性， 对补骨脂进一步开发提供科学依据。 1材料 MultiskanMK3 酶标仪（美国 Thermo Electron 公司）； LRH-150恒温培养箱（上海一恒科技有限公司）；DELTA 320 型pH计（美国Mettler-Toledo公司）；AL104型电子天平（美 国Mettler-Toledo公司）；LDZX-30KB立式压力蒸汽灭菌器 （上海申安医疗器械厂）；JJ-CJ-2FD洁净工作台（吴江市净 化设备总厂）；ZWX-201A紫外线空气消毒器；旋转蒸发仪（德 国Heidolph公司）；96微孔板；各种移液器及枪头；Bruker Avance-400M 核磁共振谱仪；Agilent 6890-5975 GC-MS 联 用仪；LC3000型高效液相色谱仪；柱色谱为青岛海洋化工生 产的填料为硅胶200?300目及硅胶H；薄层色谱为青岛海洋 化工生产生产的GF254硅胶板；Sephadex LH-20 （瑞典 Pharmacia 公司）。 二苯代苦味酰基自由基（DPPH,日本东京化成工业株式 会社）；［2, 2’ -联氨-（3-乙基苯并囈哇咻-6-磺酸）二氨 盐］（ABTS,美国Fluka公司）；没食子酸丙酯（PG, A019043001,比利时Acros organics公司）；丁基轻基茴香 瞇（BHA, A019438801,比利时 Acros organics 公司）；二 丁基羟基甲苯（BHT, A020158601,比利时 Acros organics 公司）；a-葡萄糖昔酶（Sigma公司，批号129K1426）；对- 硝基苯基-a-D-毗喃葡萄糖昔（PNPG, Sigma公司，批号 026K1516）；阿卡波糖（Acarbose, Serva 公司,批号 100434）； 小槃碱（自制，纯度98%）；培养基Nutrient Agar （北京奥 博星生物技术有限公司），Broth