观赏向日葵NBS类抗病基因类似物的克隆与分析-作物遗传育种学专业论文.docxVIP

独创性声明本人声骥，所呈交的学位(毕业)论文，是本人在指导教嬲的指导下独立完成的研 独创性声明 本人声骥，所呈交的学位(毕业)论文，是本人在指导教嬲的指导下独立完成的研 究成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方 外，论文中不包禽其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做磁贡献的同志， 都在论文中律了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行必，由本入 承担应有的责任。 学位(毕业)论文作者亲笔签名：呻历娣德 隧期：≯∥扩，多．知 论文使用授权的说明 本入完全了解福建农林大学有关傈留、使雳学位(毕业)论文的规定，邸学校有权送 交论文的复球件，兔诲论文被查阕鄢借阕；学校霹数公布论文的全都或部分内容，可躐 采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 保密，在 年后解密可适用本授权书。 口 不保密，本论文属于不傈密。’ ∥ 学位(毕业)论文作者亲笔签名：百磊娣怨 冒甥：02附罗。参，。秒 指导教师亲笔签名。) 嚣瓤硼，f∞ 福建农林大学2008属硕士毕姚论文摘要 福建农林大学2008属硕士毕姚论文 摘要 囱日葵(Hetianthus annuus)可供油用及食用，亦为观赏或维护生态景观之最佳作物。． 意嚣葵感染病害对其产豢、质量和瓣赏效果都会产生缀大的影晌。霹蒋，对于植物瘸害抟游 治逮常采用抗瘸品种及农药防治相络合的方法，但许多植物品种往往只其有单一抗性，而农 药防治对人类鹣毽麝移生活环壤帮存有整巨大的潜在威胁。随着生物技术懿不断发震，运惩 转基因技术进背植物品稃的敬嶷已被应用蓟农作物的生产中，因此植物抗病基因的宽隆对于 抗瘸遗传育种及抗赢魄制的深入研巍具骞重要盼意义。 本论文的研究起誉包括：1)掇据己知植物抗病基因NBS送的保守氨基酸结构域口．100p 和GLPL)设计筒并弓l物，以抗病性好的观赏向鼹葵品种“Valentine”(浅黄色蕾状花，深紫色管 状花)的基嚣缀DNA为模板，PC利旷增其》灞S类抗瘸基因类徽物(Resistance gene mualogs， ROAs)，并对RGAs进行生物信息学分析，搦乐观赏向因葵抗病基因的多样性及进化关系； G测羯获褥懿瓣赏逸嚣葵粼浚s设计特霁琴l黪，黠爨枝集懿麓赏渤嚣囊戛浊葵蒜释进行特吴 性比较分析；(3)对获得的观赏向西：葵SFRGA．3片段进行Southem杂交分析。主要研究结果如 下； 1．从观赏向鼹葵品种‘Valentine”蒸因组瑚妣中扩增出24条其有连续开放阅读框(oRF)的． RGAs，分别命名强：SFRGAl蟠秘婚A挺，登陆号：EUB52826-EU352849。序刭分析结果 表明；2霹条戳汰S缡玛翡氨篷黢均含有典鍪碍≥髓RI；类抗病基匾新拥有的保守结构域P．100p、 Kinase-2a、Kirtas嚣-3瘌疏水结构域@D。l弼源性搜索表明，其中9条序列与肉嚣葵羼上B嵬 鍪獒撬瘸类馥蛋鑫饔缀高的鬻源性，其它15条痔裂搜索融菜望植物上邑壳隧的抗病基因及许 多得分较高的抗病类似蛋白序列，其中包含宥很多未知基因。24个RGA核普酸序列阃的相 议性在41，1％-99．繇鑫之麓变纯，氨蒸酸序列窝的耱钕健在25。8％--t00％N变化。对分离裂静 RGAs进行系统发育树分析，无论趋核瞢酸序列还是氨基酸序列都明显地分为TIR-NBS-LRR 容蔻∞豫枣瑶S撼两类。 2。利用获得的RGA设计了3对特异性引物，其中RGAS-F1与RGA8-R1、球iAl6，Fl 粤RGAl6-R1 V熊够在各向鹾葵品种基因组DNA中扩增患与对照搬应大小的片段；露 RGA3-F1与RGA3-R1剥来在观赏向麓葵品种Sonja串扩增出条带来，可靛缺失了SFRGA3 片段，也可能是该品种的SFRGA3片段中已有郝分核管酸序列发生了突变或者发生蕊捧。 3。焦限制性内讶酶BamH至、EcoR王、焉誊戮{分舅g对溉赏淘鑫葵Valentine基霞缀进行 酶解，地高辛标记SFRGA3，并以此为探针进行了Southern杂交。结果袭明，SFRGA3在 Valentine基嚣缓枣畜1-3个拷员。 关键谴；蕊黉匈鼹葵；套泌S；毯漾；抗病基函类戗锈。 祸建农林大学2008届硕士毕业论文Abstrac童 祸建农林大学2008届硕士毕业论文 Abstrac童 Sunflower,used for oil food，is the best ornamental plants and maintaining ecological． 1andscape．Its yield and quality will decrease,if sunflower susceptible to diseases。Resently, breeding for disease resistance and a