桂花有效成分体外α-葡萄糖苷酶活性及药动因素研究-中药学专业论文.docxVIP

I I PAGE PAGE VI 摘 要 本论文共由三章组成。在前期对桂花中主要降糖有效成分齐墩果酸和熊果酸体外药 效研究的基础上，为了进一步研究影响其 α-葡萄糖苷酶抑制作用的药动学 (PK) 因素， 利用体外生物系统，建立 α-葡萄糖苷酶抑制剂的体外药动-药效 (PK-PD) 评价模型，并 对影响齐墩果酸和熊果酸体外 α-葡萄糖苷酶抑制作用的药动学因素进行了初步研究。 第一章 α-葡萄糖苷酶抑制剂体外药动-药效 (PK-PD) 模型的建立与评 价 利用 α-葡萄糖苷酶抑制模型，进一步确证了齐墩果酸和熊果酸的体外 α-葡萄糖苷 酶抑制活性，其 IC50 分别为 4.73 μg·mL-1 和 4.84 μg·mL-1。采用体外生物系统与 α-葡萄糖 苷酶抑制模型相结合的方法，建立抗糖尿病药物的体外 PK-PD 模型。齐墩果酸、熊果 酸以及阿卡波糖与大鼠肝微粒体在 37 ℃条件下孵育 15 min，无论是否有辅酶 NADPH 和 UGPDA 存在，齐墩果酸和熊果酸的体外 α-葡萄糖苷酶抑制活性基本消失，而阿卡波 糖的体外 α-葡萄糖苷酶抑制活性则不受影响。表明代谢或其他药动因素可能影响了齐墩 果酸和熊果酸体外药效的发挥，并造成其和阿卡波糖体内药效的差异。 第二章 桂花有效成分在大鼠肝微粒中代谢稳定性的评价 采用体外生物系统和 LC/MS/MS 方法对单体齐墩果酸和熊果酸进行代谢稳定性评 价。结果显示：在辅酶 NADPH 和 UDPGA 存在或不存在的情况下，齐墩果酸没有发生 酶降解和非酶性降解；熊果酸在辅酶 NADPH 存在的情况下发生了大约 58.5%左右的代 谢。表明代谢对齐墩果酸体外药效的发挥并无影响，对熊果酸体外药效的发挥有一定的 影响，但并非主要的影响因素。因此有必要对药动因素-药物与蛋白结合方面进行考虑。 第三章 中药有效成分对细胞色素 P450 酶系中 CYP3A4、CYP2D6 和 CYP2C9 的作用研究进展 本章节从细胞色素 P450 酶系中 CYP3A4、CYP2D6 和 CYP2C9 的作用特点和中药 有效成分对 CYP3A4、CYP2D6 和 CYP2C9 的研究现状进行了综述，以期更好的紧密结 合临床实际，开发新的中药资源。 关键词：桂花；齐墩果酸；熊果酸；阿卡波糖；大鼠肝微粒体；α-葡萄糖苷酶；辅酶 NADPH；辅酶 UDPGA；细胞色素 P450 III III PAGE PAGE IV ABSTRACT This dissertation is composed of four chapters. Oleanolic acid and ursolic acid as active compounds in Osmanthus active fraction were assayed in the former research. In order to study the factors of α-glucosidase pharmacokinetics (PK), the PK-PD model was established in vitro and the factors for oleanolic acid and ursolic acid pharmocodynetics (PD) were investigated. Chapter 1: The eastabilishment and evaluation of PK-PD model of α-glucosidase inhibitors in vitro. α-Glucosidase inhibitory activity oleanolic acid and ursolic acid was investigated and the half inhibitory concentration (IC50) were 4.73 and 4.84 μg·mL-1, respectively. PK-PD model was established by combining the biological systems with the α-glucosidase inhibition method in vitro. Results showed that α-glucosidase inhibitory activity of oleanolic acid and ursolic acid were lost completely after incubation with rat liver microsomes at 37 °C for 15 min, but the inhibitoryactivity of