第15章-甾体激素类药物的分析.pptVIP

（五） TLC法 主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别 （六） HPLC法 主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别（如：醋酸曲安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏） 三、 杂质检查 （一）有关物质检查 定义 与标示药物结构不同的甾体化合物都称为“有关物质” （1）TLC法（高低浓度对比法） 判定方法： 规定杂质斑点数目 规定杂质斑点颜色 （2）HPLC法（高低浓度对比法） 判定方法： 规定杂质峰数目 规定杂质峰面积 （二）游离磷酸的检查 地塞米松磷酸钠 氢化可的松磷酸钠 倍他米松磷酸钠 氢化泼尼松磷酸钠 对照品法 （三）有机溶剂残留量的检查 甲醇和丙酮 甲醇 ≤0.3% 丙酮 ≤0.5% GC法 （一）HPLC法 USP、BP、JP均采用 RP－HPLC（大多内标法） 特点 用样量少，灵敏度高，分离效 果好，测定速度快 例：黄体酮的含量测定：ODS柱； 甲醇-水（65：35）；254nm 内标：己烯雌酚 （甾体激素类药物常含有结构相似的其他甾体杂质，对利用结构特征设计的比色法有干扰） 四、含量测定 （二）UV法 △４-3-酮 240nm（±） 肾上腺皮质激素 雄性激素和蛋白同化激素 孕激素 苯环 280nm（±） 雌激素 （三）比色法 弱、非分光光度活性药物 强分光光度活性药物 化学反应 肾上腺皮质激素类 C17 -α－醇酮基 强还原性 1. 原理 OH - [还原] 四氮唑比色法 制备对照液 制备供试液 加入四氮唑盐 有色产物 484nm AX× CX AR 标示量（%）= AX AR ×V×标示量 ×100% 2、方法：以醋酸地塞米松为例 3. 讨论 （1） 基团对反应速度的影响 C11= O＞ C11－OH C21－OH＞ C21-酯 （2） 溶剂、水分的影响 含水量＞5%→ν↓ 含水10%→A↓10% 含水30%→几无反应 — 无醛无水乙醇 醛 → A↑ — 无水乙醇 （3） O2与光线的影响 反应过程 反应产物 怕光 →避光、快速 O2影响颜色强度和稳定性 →隔绝空气、 快速、充N2 （4）碱的种类及加入顺序 反应应在强碱性（pH13.75） 条件下进行 以氢氧化四甲基铵的结果最佳 加入顺序： （5） 温度与时间 t℃↑→ν↑→甲瓒分解↑ ChP 25℃ 40～45′ 肾上腺皮质激素、 雄性激素和蛋白同 化激素、孕激素 C3－酮基 1. 原理 HCl （缩合） 异烟肼比色法 2.测定方法 3.讨论 反应速度 （1） C3= O ＞ C17= O 、 C20= O C11= O 不反应 反应专属性 C3－酮基 （2）溶剂的选择 异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇 无水甲醇 无水乙醇 原理 λmax=515 雌激素 Kober反应比色法 第十章 复习内容 1、熟悉本类药物的分类，掌握其结构 特征与分析方法的关系 2、熟悉某些官能团的呈色反应，了解其他鉴别方法 3、掌握本类药物中其他甾体的检查方 法，了解其他特殊杂质的检查 4、掌握四氮唑比色法、异烟肼比色法 的原理、方法及测定条件。了解 UV法、Kober反应比色法及HPLC 法在其含量测定中的应用 .Kober反应是指雌激素类药物与_______共热呈色。( ) A.硫酸－甲醇 B.硫酸－乙醇 C.硫酸－甲醛 D.硫酸－醋酐 用四氮唑比色法测定皮质激素类 药物，是利用C17 –α醇酮基的何种性 质 A．氧化性 B．还原性 C．可加成性 D．酸性 E．碱性 * 提问可采用什么方法来提高甾体激素类药物的分光光度活性。 “ ” “ ” 第十五章 甾体激素类药物的分析 基本结构：环戊烷并多氢菲 A B C D 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 一、基本结构及分类 分类： 甾体激素 肾上腺皮质激素 性激素 雄性激素及蛋白同化激素 孕激素 雌激素 二、结构与性质 1. 肾上腺皮质激素 主要活性基团 性 质 △4 – 3 – 酮 UV、与羰基试剂反应 C17 – α – 醇酮基 还 原 性 2. 雄性激素及蛋白同化激素 主要活性基团 性 质 △4 – 3 – 酮 UV、与羰基试剂反应 C17 – β – 羟基 可成酯 3. 孕激素