衰老和凋亡相关蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达及临床意义.docx

袞老和凋亡相关蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达及临床意 义 （武汉大学，1医学院人体解剖学与组织学胚胎学系 湖北 武汉430071） （武汉江夏区第一人民医院妇产科） 【摘要】冃的：衰老和凋亡是防止肿瘤发生发展的两个关键作用机理，许 多细胞周期调控因子如P14ARF, pl5INK4b和pl6INK4a在G1细胞周期阻滞和癌 基因诱导衰老屮起重要作用。bcl-2蛋白是抗凋亡成份屮关键因子Z-,而p53 蛋口在凋亡和衰老两者屮都起重要作用，这些关键调控因子的基因在各种恶性肿 瘤屮常常突变或缺如，但还不知道凋亡和衰老如何调控女性生殖管道的肿瘤，例 如宫颈鳞状细胞癌。方法：免疫组织化学检测pl4ARF,pl5INK4b,pl6INK4a,bcl-2, p53和Ki?67的表达，每组40个样本（正常宫颈、屮度到重度宫颈上皮内瘤变（宫 颈上皮内瘤变llndash;lll）和浸润性宫颈鳞状细胞癌。样本来源于120个宫颈活 组织检查和宫颈锥形切除术。结果：结果表明在宫颈上皮内瘤变和鳞状上皮子宫 颈癌两者屮的增殖标志Ki-67显著性增加，在宫颈上皮内瘤变和鳞状上皮子宫颈 癌两者屮衰老标志pl5INK4b,pl6INK4a和pl4ARF过表达，在正常宫颈组织中p53 免疫组织化学阴性，而在宫颈上皮内瘤变和鳞状上皮子宫颈癌两者中p53显示阳 性。尽管bcl?2在宫颈上皮内瘤变表达是增加的，而接近半数的鳞状上皮子宫颈 癌病例屮bcl?2表达是阴性的。结论：宫颈上皮内瘤变和鳞状上皮子宫颈癌病例 组织屮一些衰老通路被激活并维持衰老通路激活状态，然而增殖活性也在增加, 致癌作用并没有因为衰老通路的持续激活和抗凋亡的丢失而被挫败，从宫颈上皮 内瘤变经历慢长的时间发展最终才导致鳞状上皮子宫颈癌。鳞状上皮子宫颈癌组 织屮p53过表达、bcl-2表达的丢失以及额外的衰老通路在宫颈鳞状上皮子宫颈 癌的致癌中可能起关键作用。 【关键词】衰老；凋亡；致癌作用；宫颈鳞状细胞癌 【中图分类号1R331.1+41 【文献标识码］B 【文章编号）1003-5028（2015 ） 7-0272-02 鳞状上皮子宫颈癌(squamous cervical carcinoma,SCC)?女性生殖道恶性 肿瘤中排第二位，人乳头瘤病毒(human papilloma virus, HPV)被认为是宫颈癌 致瘤中的最重要的病原作用和病原体，然而不是所有的感染了高风险HPV(HPV subtypes 16 and 18)妇女都发展成宫颈癌，常常要经过几年或十年持续宫颈上皮 内瘤变的过程最终发展成浸润性鳞状上皮子宫颈癌。 凋亡和衰老机理可以防止因积累起来的机体细胞突变而导致肿瘤，在首 次培养的成纤维细胞中描述衰老的成纤维细胞是具有稳定的细胞周期G1阻滞和 具有代谢活性细lfi[lndash;4]o视网膜神经胶质瘤(retinoblastoma , Rb)和p53 通路是看家基因，它们维持高风险HPVs程序性衰老。涉及到pRb和p53通路的 细胞周期调节蛋白有细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent dinases,CDKs) 及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(cyclin-dependent kinase inhibitprs,CDKIs),在 CDKIs中，pl4ARF? pl5INK4b和pl6INK4a是维持细胞衰老起十分重要作用的成员 , P16是细胞周期负调控因子，一旦pRb被磷酸化，细胞就会从G1期进入S 期[5,6],在各种人肿瘤中pl6INK4a基因常常无活性[7],pl4ARF是由CDKN2 (也 编码pl6INK4a蛋白)编码的一种蛋白，它们是通过抑制MDM2肿瘤蛋白从而负 调控G1/S和G2/M细胞周期的,从而阻滞MDM2介导消除p53功能[8],另一个 负调控因子是15INK4b,它是转化生长因子beta;■诱导细胞周期阻滞的下游[1]。 另一个抗癌细胞机理是凋亡，bcl?2肿瘤蛋白是定位于线粒体内膜，具 有抗凋亡作用[9],由于bcl-2的过表达可能潜在性地延长肿瘤细胞的生存并使其 恶性转化[10,11] p53在凋亡和衰老中均起重要作用，最近pl4ARF, pl5INK4b和 pl6INK4a已经被认为是衰老标志，在肺癌癌前病变中显示阳性，但在肺恶性肿 瘤中显示阴性⑴，目前，不同类型的宫颈癌报道：衰老标志以及抗凋亡标志bcl?2 的表达存在矛盾的地方[9,12ndash;17],本研究的目的是采用免疫组化技术检测 正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变和浸润性SSC组织检测宫颈癌发展过程中R14ARF, pl5INK4b, pl6INK4a,ki-67, p53 和 bcl-2 的表达。 1材料和方法 1.1材料和试剂 收集武汉大学中南医院和咸宁市中心医院199