茶树甲羟戊酸激酶基因CsMVK克隆及表达特性分析.pdfVIP

南方农业学报 JournalofSouthernAgriculture 2017，48（10）：1741-1747 ·1741· 10期 ISSN2095-1191；CODENNNXAAB DO ：10.3969/j.issn.2095-1191.2017.10.03 茶树甲羟戊酸激酶基因CsMVK克隆 及表达特性分析 * 王鹏杰，陈 丹，曹红利，姚雪倩，陈 笛，杨国一，郑知临，叶乃兴 （福建农林大学 园艺学院/茶学福建省高校重点实验室，福州 350002） 摘要：【目的】克隆茶树甲羟戊酸激酶基因（CsMVK），分析其生物学信息及在不同组织及乌龙茶做青过程中的表 达特性，为研究茶叶加工过程中香气形成机制提供参考。【方法】RT-PCR扩增CsMVK基因，应用生物信息学软件对其 编码蛋白（CsMVK ）的氨基酸序列进行预测分析，通过实时荧光定量PCR （qPCR ）分析CsMVK在茶树不同组织及乌龙 茶做青过程中的表达特性。【结果】克隆获得的CsMVK基因（GenBank登录号MF668187）全长1455 bp ，开放阅读框 （ORF ）长度为1164 bp ，编码387 个氨基酸，蛋白质分子量41.18 kD ，理论等电点（pI ）5.88。CsMVK 蛋白具有 GHMP_kinases_N domain 和GHMP_kinases_C domain 2个功能结构域，定位于细胞质中，不存在跨膜结构和信号 肽。系统发育进化树分析结果显示，CsMVK与三七、常春藤的MVK聚为一类，表明茶树与三七、常春藤的亲缘关系 最近。qPCR检测结果显示，CsMVK基因在果实中的表达量显著高于其他组织（P0.05 ，下同），在不同组织中的表达 量排序为：果实＞根＞叶＞茎＞花；在乌龙茶做青过程中，从鲜叶到晒青叶，CsMVK基因的表达量上升，晒青到一摇 过程中表达量下降，经过3次摇青，其表达量持续升高并在杀青前达最大值，与其他做青阶段差异显著。【结论】 CsMVK基因表达与茶叶香气品质形成有关。 关键词：茶树；甲羟戊酸激酶（MVK ）；乌龙茶；做青；表达特性；香气 中图分类号：S571.103.53 文献标志码：A 文章编号：2095-1191（2017 ）10-1741-07 Cloningandexpressionofmevalonatekinasegene CsMVKinteaplant WANG Peng-jie ，CHEN Dan ，CAO Hong-li ，YAO Xue-qian ，CHEN Di ， YANG Guo-yi ，ZHENG Zhi-lin ，YE Nai-xing* （College of Horticulture ，Fujian Agriculture and Forestry University/Key Laboratory of Tea Science at Universities in Fujian ，Fuzhou 350002 ，China ） Abstract：【Objective 】Mevalonate kinase gene （CsMVK ）from tea pla