脂酶非均相催化反应生物传感器的研究.pdfVIP

2011年11月 中国粮油学报 V01．26，No．11 第26卷第11期 JournaloftheChineseCerealsandOilsAssociation Nov．2011 脂酶非均相催化反应生物传感器的研究 齐 颖 陈晓慧 关 茵 常云鹤 于殿宇 (东北农业大学食品学院，哈尔滨150030) 摘 要研究固定化脂肪酶在生物传感器上的响应，研制了能将脂肪酶催化底物所产生的电子转移过程 转换为电流信号输出的电化学生物传感器，酯酶非均相反应体系温度为65℃，pH为7．7时验证脂酶活性的 变化规律。测定反应体系电流强度的变化趋势为首先是平稳，反应开始电流逐渐增大，随着甘二酯逐渐增多， 电流变化缓慢；当甘一酯的量逐渐增多电流也变大，反应结束电流趋于平稳。用液相色谱仪跟踪测定反应过 程中底物的含量，结果显示测量相对误差仅为4．9％。证明利用脂酶非均相催化反应生物传感器测定酶催化 底物反应的程度是可行的，为实现计算机连续在线检测提供了理论基础。 关键词 生物传感器脂肪酶非均相 电流相对误差 中图分类号：TP212．3文献标识码：A 文章编号：1003—0174(2011)1l一0102—04 随着科学技术的发展，生物传感器已经成为生 性、灵敏性和电学的简便、迅速巧妙地结合起来，可 物质技术必不可少的一种先进的检测方法与监控方 以在一个复杂的体系中，不受其他物质干扰，快速准 法，也是物质分子水平的快速、微量分析方法，具有 确测出某些物质的含量，并可监测酶与底物反应的 较高的选择性和灵敏度…。 程度。 生物传感器是一种特殊的器件或装置旧J，应用 的是生物机理，与传统的化学传感器和离线分析技 1 材料与方法 术相比，具有高选择性、高灵敏度、较好的稳定性、能 1．1试剂与设备 在复杂体系中进行快速在线监测等优点旧J。基本工 磷酸二氢钾(分析纯)：天津市化学试剂三厂；磷 作原理是：当底物的分子质量发生变化时，会有相 酸氢二钠(分析纯)：天津市鑫铂特化工有限公司；氢 应的阴阳离子生成，将生物敏感元件发生的特异性 氧化钠(分析纯)：天津市光复科技发展有限公司；铁 反应及信号经由物理元件——换能器，转变为光、 氰化钾(分析纯)：上海江莱生物科技有限公司；去离 电、声等易检测信号，从而可将反应程度用离散或 子水：娃哈哈集团有限公司。 连续的数字信号表达出来[4]，间接地获知待测物的 ML 54电子分析天平、FE20 pH计：梅特勒一托 有关信息。现在所用的生物元件包括抗原或抗体、 利多仪器有限公司；DK一2000一IIIL恒温水浴锅：天 酶或基质、各种酶的混合体、整个细胞或部分细胞、 津市泰斯特仪器有限公司；C655一斗A电流表：哈尔 植物或动物组织和神经受体∞1。目前生物传感器 滨三达德电力技术有限公司；YHWl104远红外恒温 主要应用于食物、农业、生物技术、药物和军事领