观察长期高脂饮食大鼠视网膜微血管的变化及吡格列酮干预疗效-内科学专业论文.docxVIP

观察长期高脂饮食大鼠视网膜微血管的变化及吡格列酮干预疗效-内科学专业论文.docx

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河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。 本学位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。 河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学 位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材 料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河=l 承担相应的法律责任。研究生签瓣师签名仳 06-年 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了 文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他入已经发表或撰 写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写, 文责自负。研究生签诽 导师签名:溉 ∥g年乡月形日 中文摘要观察长期高脂饮食大鼠视网膜微血管的变化 中文摘要 观察长期高脂饮食大鼠视网膜微血管的变化 及吡格列酮干预疗效 摘 要 目的:近年来,脂代谢紊乱、肥胖因其可导致严重的心 脑血管病变而影响人民健康,被日益受到关注。随着研究的 展开和深入,研究者发现肥胖、脂代谢紊乱对视网膜微血管 也有影响。目前,有关高脂血症、肥胖引发视网膜微血管损 伤的具体机制尚不十分清楚。本实验旨在探讨长期高脂饲养 建立的肥胖高脂伴胰岛素抵抗SD大鼠模型视网膜微血管的 变化以及缺氧诱导因子(hypoxia inducible factors,HIF).1、 血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor’ VEGF)、细胞间粘附分子(intercellular adhension molecule, ICAM).1以及转化生长因子(transforming growth factoq TGF).p mRNA的表达变化和毗格列酮的干预疗效。 方法: 1 8周龄雄性SD大鼠随机分为3组,正常对照组(NC)、 高脂饲养组(HF)、高脂加吡格列酮干预组(HP)。NC组予 正常饲料,HF组和HP组予高脂饲料喂养,同时,HP组予 吡格列酮15mg·kg-1.d 1剂量灌胃,NC组、HF组给予等剂量 蒸馏水灌胃,每日一次。32周末收集24小时尿行24小时尿 白蛋白定量检测。2天后大鼠情况稳定行正常血糖高胰岛素 钳夹实验评价外周胰岛素抵抗程度。其余大鼠处死,采血检 测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、血游离脂肪酸 (FFA)、甘油三酯(TG)等指标;取一侧眼球固定行视网 中文摘要膜毛细血管铺片PAS染色以及免疫组织化学染色,另-N分 中文摘要 膜毛细血管铺片PAS染色以及免疫组织化学染色,另-N分 离视网膜组织采用实时荧光定量PCR(Real.time PCR)方法 测定三组大鼠视网膜组织HIF.1、VEGF、ICAM.1和TGF.p mRNA的表达情况。 2统计学处理 所有资料以SPSSl0.0统计软件进行分析,首先用描述 性统计和分析研究变量分布,符合正态分布的测定值以(i is) 表示,两组间的比较采用t检验,多组间的比较采用方差分 析。 结果: l从进入实验第二周开始,高脂饲养组体重即开始增 加,32周时,HF组和HP组大鼠体重、内脏脂肪重量及内脏 脂肪占体重百分比均明显高于NC组(P均O.01)。与NC组相 比,I-IF组空腹血糖、胰岛素、游离脂肪酸、甘油三酯、24h 尿白蛋白定量水平均明显升高,差别有统计学意义;HP组较 HF组有所降低。 2正常血糖高胰岛素钳夹实验:与NC组相比,HF组的 GIR显著降低,稳定状态下平均GIR仅为(4.8+1.2) mg.min1.kg一,而NC组稳定状态下平均GIR为(11.3il.7) mg.min-1.kg~,差别有显著意义(PO.01),而HP组为 (10.1-4-1.5)mg.minl.kg~,与NC组相比,差别有显著意义(P O.01)。 3视网膜毛细血管铺片.PAS染色显示:NC组:动脉旁毛 细血管网分布规则,动静脉血管走形较直,毛细血管粗细均 匀,内皮细胞和周细胞规律分布,形态规则,周细胞内皮细 胞比例1.082;HF组:动脉旁毛细血管网分布较乱,走形不 中文摘要直,内皮细胞增生,周细胞减少,且细胞形态不规则,还可 中文摘要 直,内皮细胞增生,周细胞减少,且细胞形态不规则,还可 见周细胞凋亡,白细胞聚集以及无细胞毛细血管形成等现 象,但未见影周细胞及微血管瘤形成,周细胞内皮细胞比例 0.483;HP组:动脉旁毛细血管网分布较规则,走形较直, 内皮细胞增生及周细胞减少现象均有所好转,细胞形态亦较 规则,未见无细胞毛细血管,周细胞内皮细胞比例O.755。 4视网膜毛细血管铺片免疫组织化学染色:可见视网膜 血管呈现棕黄色阳性着染,动静脉染色深,微血管染色浅。 HF组HIF.1、VEGF的表达比N

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