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课件:非发酵菌实习.ppt
辨认非发酵菌的基本方法 1. 在克氏铁琼脂(KIA)上为K/K; 2. 大多数氧化酶阳性; 3. 细菌多不能在麦康凯平板上生长或生长不良. 2019 - * 非发酵菌的初步分群 1. 葡萄糖的利用; 2. 麦康凯平板上生长能力; 3. 氧化酶; 4. 动力. 2019 - * 非发酵菌各菌属间的鉴别 O-F葡萄糖 OX H2O2 尿素 鞭毛 其 它 特 征 假单胞菌属 O/- +/- + -/+ 极生 不动杆菌属 O/- - + - 无 无色杆菌属 O + + -/+ 周生 土壤杆菌属 O + + + 周生 产碱杆菌属 - + + - 周生 黄杆菌属 (F) + + -/+ 无 产黄色素 莫拉菌属 - + + - 无 对营养要求高 金氏杆菌属 (F) + - - 无 艾肯氏菌属 - + - - 无 菌落小 2019 - * 非发酵菌 嗜麦芽窄食单胞菌 葡萄糖产酸 无色杆菌属 土壤杆菌属 假单胞菌属 动力 + OX OX - 不动杆菌属 + 葡萄糖产酸 黄色素 摩拉氏菌属 黄杆菌属 - - - + + 端鞭毛 - + - + + 产碱杆菌属 尿素 - + 常见不发酵菌的鉴定双岐索引 2019 - * 第 一节 假单胞菌属 (Pseudomonas) 一、 概述 1. 分类 2. 临床意义 3. 微生物特性 4.微生物检验 (1)检验程序 (2)鉴定 (3)药物敏感性试验(Antibacterial Susceptibility Test) 2019 - * 1.分类 假单菌属按rRNA同源性分为5群及未确定rRNA同源群有关的种 一群需氧、不发酵葡萄糖 无芽胞,有鞭毛 氧化酶阳性的革兰阴性杆菌 多为条件致病菌 2019 - * 2.临床意义 假单胞菌属分布广泛,人类不发酵菌感染中,假单胞菌超过50%,其中主要为铜绿假单胞菌. 2019 - * 3.微生物特性 革兰阴性、无芽胞、专性需氧 有端鞭毛或丛鞭毛 生长温度范围广,最适生长温度为35℃ 产生各种水溶性色素:绿脓素、脓玉红素、荧光素、脓褐素 对理化因素耐受性较强,对多种抗生素耐药 2019 - * 二. 铜绿假单胞菌 生物学特征: 1:形态和染色; 革兰阴性,长短不一 单鞭毛 生长温度25~42℃ 2019 - * 菌落形态: 常见有5种菌落形态: 典型菌落:菌落呈灰绿色,扁平湿润,边缘不规则,表面常可见金属光泽; 大肠菌样型:圆形凸起,灰白色半透明; 粘液型:菌落光滑呈粘液状 侏儒型:细小,无光泽的半透明状菌落; 粗糙型:中央凸起,边缘扁平,表面粗糙。 有生姜味 可产生多种色素: 荧光素与绿脓素 2019 - * 2019 - * 毒力因子 致病机制 结构成分 粘附素:粘附 荚膜多糖:抗呑噬 毒素 内毒素:LPS 外毒素:A 阻止真核细胞蛋白质合成 S 干扰吞噬杀菌作用 绿脓素:具有氧化还原活性,催化超氧化物和 过氧化氢产生有毒基团 酶类 弹性蛋白酶:丝氨酸蛋白酶(Las-A) 降解 弹性锌金属蛋白酶(Las-B)蛋白 磷脂酶C: 分解脂质和卵磷脂,损伤组织细胞 2019 - * (1 )分离培养与鉴定: 标本可接种于血琼脂平板培养基和选择性培养基 鉴定根据镜下特征、菌落形态、生化反应等 3.微生物检验 2019 - * 42℃ 生长 明胶 液化 鞭 毛 + + 极单鞭毛···铜绿假单胞菌 - + 极多鞭毛···荧光假单胞菌 - - 极多鞭毛···恶臭假单胞菌 OF试验:O 氧化酶:+ 精氨酸水解:+ 葡萄糖酸氧化:+ 氮气:+ 标本 分离培养基 涂片检查 肉汤培养基 血琼脂平板 SS、麦康凯琼脂平板 挑选可疑菌落(37℃ 培养18-24h观察 有无色素产生,色素鉴别接种金氏 A、B培养基) 无色素菌株 42℃ + 绿脓素+ 绿脓菌荧光素 铜绿假单胞菌 铜绿假单胞菌的鉴定程序 - 2019 - * 铜绿假单胞菌的最低鉴定特征 单端鞭毛(三根以下) + 97 动 力 + 97 氧化分解(O-F培养基) 葡萄糖 + 98 乳糖、蔗糖 - 0 木 糖 +/- 85 氧化酶 + 100 赖氨酸脱羧酶 - 0 精氨酸双水解酶 + 99 鸟氨酸脱羧酶 - 0 H2S产生 - 0 在42℃ 生长 + 100 2019 - * (2)抗原检测:血清学分型、噬菌体分型 (3)
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