课件：第章环境工程微生物.ppt

三、反硝化作用（Denitrification） 1、概念：厌氧条件下，硝酸盐还原细菌将硝酸盐还原为N2或N2O，这个过程称为反硝化作用。 根据生物对硝酸盐的利用可分为： 异化硝酸盐还原作用（脱氮作用或狭义的反硝化作用） 同化硝酸盐还原作用 - ①（异化）反硝化作用 反硝化细菌（兼性厌氧菌）在厌氧条件下，将硝酸盐还原为氮气。 HNO3→HNO2→HNO→N2O→N2 此过程使土壤氮素损失，对农业不利；环保可用于减少氮素污染，防止水体富营养化。但大面积土壤反硝化作用产生的N2O是温室效应气体之一，会加重大气污染，还会破坏O3层。 - ②同化硝酸盐还原作用 大多数细菌、放线菌和真菌利用硝酸盐为氮素营养，将硝酸盐还原成氨，进一步合成氨基酸、蛋白质和其他物质。 HNO3→HNO2→HNO→HN(OH)2→NH2OH→NH3 NO3-用作微生物氮源时，它被还原成NH4+，此过程消除了土壤中硝态氮易流失、淋失的途径。 - 2、参与反硝化作用的微生物 （1）异养型的反硝化菌 如 脱氮假单胞菌（P．denitrificans） 铜绿假单胞菌（P．aeruginosa） 荧光假单胞菌（P．fluarescens） - 上述细菌在厌氧条件下利用NO3-中的氧氧化有机质，获得能量： C6H12O6＋4NO3→6H2O＋6CO2＋2N2+能量 - （2）自养型的反硝化菌 脱氮硫杆菌（T．denitrificans）在缺氧环境中利用NO3-中的氧将硫或硫代硫酸盐氧化成硫酸盐，从中获得能量来同化CO2。 （3）兼性化能自养型的反硝化菌 脱氮副球菌（Paracoccus denitrificans）能利用氢的氧化作用作为能源，以O2或NO3-作为电子受体，使NO3-被还原成N2O和N2。 - 5、反硝化作用的实际应用 污（废）水处理后出水中的硝酸盐能通过反硝化作用生成致癌物质亚硝酸胺，造成二次污染 污水生物处理系统中可利用反硝化作用脱氮（硝酸盐） 污水生物处理系统中的二沉池发生反硝化作用会导致污泥的上浮，影响出水水质 土壤中发生反硝化作用使肥力降低 - 四、固氮作用（Nitrogen Fixation） 1、概念：在固氮微生物的固氮酶催化作用下，分子氮转化为氨，进而合成为有机氮化合物的过程。 - 2、固氮作用的类型 自生固氮 固氮菌属（Azotobacter）及蓝细菌等原核微生物可将大气中游离氮（N2）转变成自身菌体蛋白质。固氮微生物死亡后，细胞被分解，释出氨，成为植物的氮素营养。所以，自生固氮是间接供给植物氮源，固氮效率低。并且，当环境中存在结合态氮（如NH4+、NO3-等）时，自生固氮菌就失去固氮能力。 - 共生固氮 根瘤菌和弗兰克氏菌分别与豆科植物和非豆科植物共生固氮。此外，蓝细菌与真菌的共生体地衣中的一些种，也有固氮作用。共生固氮直接供给植物氮源，固氮效率高，固氮基因通常被去阻遏，即使有NH4+存在，固氮酶仍有活性。 关于细菌与非豆科植物形成的根瘤或叶瘤是否固氮，目前尚无明确看法。 - 联合固氮 某些固氮菌，如固氮螺菌（Azospirillum），与高等植物的（水稻、甘蔗、热带牧草等）根标或叶际之间的一种简单而特殊的共生固氮作用，是介于典型的自生固氮与共生固氮之间的一种中间型，又谓“弱共生”或“半共生”固氮作用。它与典型共生固氮的区别是不形成根瘤、叶瘤那样独特的形态结构；与普通自生固氮的不同是有较大的专一性，且固氮作用强得多。 - 3、固氮作用的途径 N2+6e+6H++nATP?2NH3+ nADP + nPi 固氮反应是固氮酶催化作用下进行的，反应需要能量和电子，平均每还原1mol氮为2mol氨需要24molATP，其中9molATP提供3对电子用于还原作用，15molATP用于催化反应。 ATP需与Mg2+结合形成Mg2+—ATP复合物才起催化作用。 - 固氮酶 生物固氮主要是依靠固氮微生物体内的固氮酶催化进行的，固氮酶由固氮基因编码控制，氧抑制固氮基因转录，抑制固氮作用进行，因组成固氮酶的铁蛋白和铁钼蛋白，对氧都很敏感，会被氧钝化。在不同的固氮微生物体内，存在着各自不同的防氧保护系统。如好氧菌细胞内的固氮酶处于对氧的作用受到保护的微环境中，兼性厌氧菌固氮作用只发生在厌氧条件下，蓝细菌在不产氧的异形胞中进行固氮，等等。 - 固氮产物NH3对固氮酶的生物合成具有阻遏作用。若环境中存在结合氮，自生固氮菌就不会合成固氮酶。通过固氮基因去阻遏，获得能向体外分泌氨的突变体，就能与共生的