海洋生物Ⅰ号抗鼻咽癌活性成分的提取和初步分析-病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

海洋生物I号抗鼻咽癌活性成分的提取和初步分析中文摘要 海洋生物I号抗鼻咽癌活性成分的提取和初步分析 中文摘要 【目的】提取、纯化海洋生物I号抗鼻咽癌活性成分并对其初步定性 分析。 【方法】用乙醇将海洋生物I号浸泡，获取乙醇粗提物。用系统溶 剂法，将乙醇粗提物与硅藻土混匀，分别用石油醚II、乙酸乙酯、水饱和 正丁醇等反复通过快速减压柱洗脱而进一步分离得到提取物A、B、C，用MTT 法测定各提取物体外抗鼻咽癌CNE-2Z细胞活性。选用抗肿瘤活性较好且水 溶性最好的提取物C，通过大孔吸附树脂HP20柱，取得纯化物并测 定各纯化物体外抗鼻咽癌CNE一2Z细胞活性。采用薄层色谱法探索抗鼻咽癌 活性成分及其纯化物的柱色谱条件，并结合化学反应、荧光分析法等对其 进行初步定性分析。 【结果】海洋生物I号提取物A、B、C的提取率(相对海洋生物I号总质 量)分别为0．17％、0．14％、0．40％。通过MTT法筛选，发现提取物B及c对人 鼻咽癌CNE一2Z细胞生长有较明显的抑制作用，而A的作用不明显。提取物c纯 化后得到5个组分，MTT分析结果显示，C4、C5对人鼻咽癌CNE一2Z细胞生长有 显著的抑制作用，而其它组分则不明显。提取物B薄层色谱的最佳展开系统为氯 仿一甲醇，其次为乙酸乙酯一乙醇一氨水；而c4、c5、C的最佳展开系统为乙酸乙 酯一乙醇一氨水。各提取物及其纯化物中没有检测到醌类、黄酮类、鞣质及酚类等 化合物，但均含有一定的蛋白质、多肽或氨基酸；A、B可能含有机酸或脂肪酸 类物质；A、B、C均有甾体、萜类物质，其中薄层色谱结果显示B含量丰富；c、 c4、C5可能含有生物碱类物质；c、C3、c4中可能含有糖、多糖或甙类物质。 【结论】(1)海洋生物I号抗鼻咽癌活性成分主要存在于提取物B、c中。 (2)提取物C纯化后，其抗鼻咽癌活性成分主要富集于c4、c5中。(3) 氯仿一甲醇展开系统、乙酸乙酯一乙醇一氨水展开系统均可作为提取物A、B柱色谱 的参考条件；可选用乙酸乙酯一乙醇一氨水展开系统作为c4、c5、c的柱色谱的参 考条件。(4)提取物A、B、C各有不同程度的抗鼻咽癌活性，可能与各含有不 考条件。(4)提取物A、B、C各有不同程度的抗鼻咽癌活性，可能与各含有不 同量的甾体、萜类或生物碱类物质有关。(5)提取物B有较强抗鼻咽癌活性可 能在于含有中等极性的甾体、萜类等物质；提取物c有较强抗鼻咽癌活性可能 在于其含有生物碱类物质。(6)提取物C的纯化物C4、C5，其主要活性成分 可能是生物碱类物质。(7)现有方法提取的蛋白质、多肽或氨基酸类物质及糖 类物质，其抗肿瘤活性不明显。 【关键词】海洋生物；乙醇提取法；系统溶剂法；CNE一2Z细胞；MTT；鼻咽 癌；HP20：薄层色谱 Extraction Extraction and preliminary analysis of the Active Ingredient against the Nasopharyngeal Carcinoma from the No．1 Marine Organism ’ABSTRACT [Objectives]To extracLselect,purify the anti-nasopharyngeal carcinoma active ingredient from the No．1 Marine Organism and carry on its preliminary qualitative analysis． [Methods]hlfuse the entire No．1 Marine Organism by ethanol first，and obtain the ethanol extraction of No．1 Marine Organism，and then mixe uniformly the ethanol extractions wi_【1l the diatomaceous earth．Using the Petroleum ether,the Ethyl acetate． the water saturated n-Butanol by the system solvent extraction，we repeatedly eluted the dry-column oashchromatography(DCC)to further separate and obtain the extraction of A，B，C．MTT method was used to select the separation components’S effects on nasopharyngeal carcinoma cell line(CNE