牦牛源多杀性巴氏杆菌ompH基因原核表达及抗原性鉴定.pdfVIP

牦牛源多杀性巴氏杆菌ompH基因原核表达及抗原性鉴定.pdf

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新疆农业科学2012,49(1):146—149 Sciences XinjiangAgricultural DOI:CNKI:65—1097/S2239.023网络出版时间:2012—1—3122:39:28 网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/65.1097.S2239.023.html 牦牛源多杀性巴氏杆菌ompH基因 原核表达及抗原性鉴定 田亮1…,康立超2,赵文娟2,薄新文2,马勋1 (1.石河子大学,新疆石河子832003;2.新疆农垦科学院新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆石河子832000) 摘要:【目的】克隆、表达牦牛源多杀性巴氏杆菌(Pm)外膜蛋白基因H(ompH)并鉴定其抗原性。【方法】扩 增牦牛源多杀性巴氏杆菌去信号肽的ompH基因,构建原核表达载体pET28a—ompH,转化大肠杆菌BL21 (DE3)并诱导表达,通过SDS—PAGE鉴定表达目的蛋白,利用Westernblot检测该蛋白的抗原性。【结果】成 kDa, 功克隆、构建了牦牛源多杀性巴氏杆菌去信号肽的pET28a—ompH原核表达载体。诱导表达蛋白约38 Western blot检测重组蛋白具有良好的抗原性。【结论】ompH基因的成功表达为重组OmpH蛋白的血清学检 测方法的建立、多克隆抗体的制备及疫苗的研制奠定了基础。 关键词:牦牛;多杀性巴氏杆菌;ompH基因;原核表达 中图分类号:$823.8+5;S188+.2文献标识码:A 文章编号:11301—4330(2012)01—0146—04 and ofthe ExpressionAntigenicityAnalysis GeneofPasteurella OmpH multocidafromYak TIAN Xunl Lian91,KANGLi—cha02,ZHAO Xin—wen2,MA Wen—juan2,BO ofAnimal (1.College ScienceTechnology,ShiheziUniversity,ShiheziXinjiang and Reclamation AcademyofAgricultural Laboratory Sciences/Key ofSheepBreedingBiologyTechnologyof ProductionandConstruction Xinjiang co删,ShiheziXinfiang832000,China) to clone aims and therecombinant of Abstract:【Objective】The study express OmpHpreotein Pasteurella deleted ofPmfrom multocida(Pm)fromyak.【Methods】The signal

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