动物细胞工程-课件.pptVIP

2.2 动物细胞工程 1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养 （糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等） 3、温度和pH 36.5+（-）0.5℃ ，PH为 7.2-7.4 4、气体环境 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 1、大规模生产蛋白质生物制品 2、为烧伤病人提供可供移植皮肤 3、用于检测有毒物质 4、为基因工程提供受体细胞 5、用于科学研究 1．在动物细胞培养的有关叙述中正确的是（ ） A. 细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中 B. 动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等 C. 动物细胞培养只能传50代左右，所培育的细胞会衰老死去 D. 动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理 2．用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （　 ）A. 容易产生各种变异 B.具有更强的全能性C. 取材十分方便 　 D.分裂增殖的能力强 * “温故知新” 1.植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 植物组织培养、植物体细胞杂交 离体的植物器官、组织或细胞（外植体） 愈伤组织 胚状体或丛芽 完整植株 脱分化 再分化 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 正在融合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 去细胞壁 纤维素酶 果胶酶 物理方法 化学方法： 离心 振动 电刺激 聚乙二醇(PEG) 脱分化 植物组织培养 植物细胞融合 酶解法 人工诱导方法 过程： 意义？ 克服不同生物远源杂交不亲和的障碍！ 原理？ 细胞膜的流动性 和细胞的全能性。 再分化 融合完成的标志 2.动物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体 ——其他动物细胞工程技术的基础 “动物细胞培养发展历史” 20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的争论。 1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。 哈里森的实验不仅解决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后，在许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培养。 问题讨论: 取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后构建人造皮肤再移植。 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？ 图2-15 用培养的人细胞构建的人造皮肤 一、动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物机体内取出 ，将它分散成 ，然后，放在适宜的 中，让这些细胞 。 相关的组织 单个细胞 培养基 生长和增殖 1.概念： 2.原理： 细胞的增殖 一、动物细胞培养 幼龄动物 3、过程： 取动物器官 和组织 剪碎组织 胰蛋白酶处理 细胞培养 单个细胞 单个细胞的获取 细胞悬浮液的制取 细胞的传代培养 细胞的原代培养 1、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官，请解释原因？ “想一想” 胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛 2、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？ 没有 3、动物细胞培养过程是否将组织分散成单个细胞了呢？ 是 单个细胞的获取 ４、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？ ５、胰蛋白酶有什么作用呢？由此可说明细胞间的物质主要是什么成份？ ６、细胞膜的主要成份是什么？ 剪刀剪碎,然后用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 胰蛋白酶水解蛋白质 蛋白质和磷脂 细胞间的成份主要是蛋白质 “知识拓展”动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 单个细胞的获取 ７、胰蛋白酶对细胞有损伤作用吗？ ８、既然胰蛋白酶对细胞有损伤作用，那将动物组织分散成单个细胞时我们应该注意什么问题呢？ 有 注意时间的控制 ９、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 不能，因为动物细胞培养适宜的PH为7.2-7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 单个细胞的获取 ( ) ( ) 单个细胞 “试一试” 取动物组