课件：肿瘤坏死因子与溃疡性结肠炎.pptVIP

肿瘤坏死因子α基因多态性与溃疡性结肠炎相关性 李文清 陈玉丽 王承党 吴婷 陆岽 林经安福建医科大学附属第一医院消化内科 350005 福州 溃疡性结肠炎（ulcerative colitis UC）是一种累及结肠膜和粘膜下层病变的慢性非特异性肠道炎性疾病，临床表现为腹泻、腹痛、粘液脓血便，欧美发达地区发病率高，我国的发病率呈逐年上升。群体流行病学调查和双生子研究显示UC发病与遗传、免疫和环境等因素有关。 肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis Factor α ，TNFα）是一种重要的促炎细胞因子，具有广泛的诱导炎症和免疫调节功能。为了探讨TNF-α基因多态性与UC的相关性，我们采用序列特异引物PCR方法（SSP-PCR）对57例UC患者及127例健康正常人进行TNF-α基因多态性检测。 1 资料与方法 1.1 研究对象：本院2002.3-2004.10就诊汉族UC患者57例，其中男性42例，女性15例，年龄为21～68岁，所有患者都经过临床、实验室、肠镜及组织学检查,诊断符合2000 年成都全国IBD 学术研讨会制定的标准 [1]，同时以127名汉族健康体检者为正常对照组。 1.2 DNA的提取：取抗凝血液2ml, 按蛋白酶K 消化,盐析法抽提、纯化DNA； 1.3 TNF- α基因的检测：根据文献 [2 ]报道的引物序列和方法操作。1.4 统计分析：采用10.0 SPSS 统计软件包的χ2卡方检验。 2 结 果 2.1 TNFα基因多态性PCR结果:见图1、2和3 A B C M 图1 TNF-α-857 PCR电泳图谱 A: CC纯合型, B: CT杂合型, C: TT纯合型, M: Mark A B C M 图2 TNF-α-863 PCR电泳图谱 A：CC纯合型 B：CA杂合型 C：AA纯合型 M: Mark A B C M 图3 TNF-α-1031 PCR电泳图谱 A：TT纯合型 B：TC杂合型 C：CC纯合型 M: Mark 2.2 UC和正常人TNF-α基因检测结果：表1中的UC和正常对照组的TNF-α各基因型分布，经χ2检验，分布符合哈迪-温伯格(Hardy-Weinberg)平衡（p0.05），表示所选人群具有代表性；UC和对照组二者之间的TNF-α各位点的基因型分布和等位基因频率的比较，差异无显著性（p0.05）； 表1：UC和正常人TNFα基因型和等位基因频率的分布 组 别 n -857 Geneotype CC TC TT -863 Geneotype CC CA AA -1031 Geneotype TT TC CC UC 57 45 (78.9%) 12 (21.1%) 0 (0 %) 46 (80.7%) 11 (19.3%) 0 (0.0%) 40 (70.2%) 15 (26.3%) 2 (3.5%) 对照组 127 90 (70.9%) 35 (27.6%) 2 (1.6%) 87 (68.5%) 38 (29.9%) 2 (1.6%) 88 (69.3) 37 (29.1%) 2 (1.6%) χ2 =1.9 , P =0.387 χ2 =3.38 , P =0.185 χ2 =0.766 , P =0.092 -857 allele C T -863 allele C A -1031 allele T C UC 102 (89.5%) 12(10.5%) 103(90.4%) 11(9.6%) 95 (83.3%) 19(16.7%) 对照组 215(84.6%) 39(15.4%) 212(83.5%) 42(16.5%) 213(83.9%) 41(16.1%) χ2 =1.536 P =0.215 χ2 =0.576 P =0.448 χ2 = 0.16 P =0.9 2.3不同地区人群的TNF-α等位基因比较：表2显示中国汉族人TNFα的-857(C/T),-863(C/A), -1031(T/C) 位点基