血小板免疫和血小板输注无效-Gian-Paolo-Visentin.ppt

双色，100个磁珠判定准确结果 Luminex方法的抗体检测实验 13种不同的Luminex磁珠 分别代表HLA-I,II抗原 每个磁珠包被6种HLA-I细胞和8种HLA-II细胞 Luminex检测系统 Luminex抗体检测 REAL 血小板免疫失调 药物诱发的血小板减少症-DITP 自身免疫引起的血小板减少症-ITP,AITP 新生儿同种免疫血小板减少症-NATP HLA 和HPA 输血后紫癜-PTP 血小板输注无效 HLA和HPA 粒细胞抗体---TRALI HNA 输血相关急性肺损伤 TRALI定义： 急性肺损伤（ALI)发生在输血后6h以内，并且以前无急性肺损伤病史，无其它相关的急性肺损伤的危险因素。 可能TRALI： ALI发生在输血后6h以内，以前无急性肺损伤病史，存在一个以上相关的急性肺损伤的危险因素 ALI定义： SpO2 90% or Pa02/Fi02 300 mm Hg 血氧偏低 X线有渗出性病变 输血相关急性肺损伤 急性肺损伤的危险因素 直接肺损伤 间接肺损伤 呼吸 脓毒症 肺 休克 吸入性中毒 外伤 肺挫伤 烧伤 溺水 急性胰腺炎 心肺搭桥 药物中毒 不同血液制品TRALI的发生率 TRALI 反应模式图 人粒细胞抗原系统（HNA） 人粒细胞抗原系统（HNA） 粒细胞特异性抗体的临床应用 非溶血性发热反应 TRALI 新生儿粒细胞减少症 自身免疫性粒细胞减少症 骨髓移植后持续性粒细胞减少 下一步 HLA\HPA供者库的建立 HPA基因多态性频率表 CD36（GPIV)糖蛋白 88KD 在单核细胞，血管内皮细胞，有核红细胞，脂肪细胞和血小板上有表达 受体: IIV型胶原，疟疾感染红细胞，血小板反应素，氧化LDL，长链脂肪酸 同种抗原NaKa-1989 CD36缺乏 血小板： 亚洲人：3-11% 美国-非洲人：2.5% 沙哈拉非洲人：7.8% 高加索人种：0.06% 第一类：血小板和单核细胞缺失，导致输血或怀孕产生抗CD36的反应 第二类：仅仅是血小板缺失 CD36基因 32kb,15外显子 染色体：7q11.12 日本:CD36缺失出现4个变异 T478C 在外显子4上的变异最常见 Pro90Ser, 81Kb阻止变异 非洲:CD36缺失出现7个变异 T1264G在外显子10变异最常见 终止密码子 NATP的诊断 常用诊断NATP的方法比较 单克隆ACE 28/32 免疫荧光 21/32 （主要是流式细胞技术） GTI 或其它公司ELISA 14/32 全部基因型 12 部分基因型 5 很多实验室联合应用多种方法 血小板抗体ELISA检测 流式细胞仪（免疫荧光） 流式细胞仪的应用流体学原理 FC放散光路 FC分离细胞群 荧光柱状图 血小板多态性Luminex 100/200 磁珠法检测 Luminex检测 血清和磁珠孵育 洗涤 抗-人IgG孵育 调整体积 收集数据 分析数据 商品化的血小板抗体检测试剂 GTI: PAK-PlusTM, PAK-AutoTM, PAK-LX, MACE-1TM, PF4-enhanced IMMUCOR: ? Capture -PTM, MCPTM, Capture-P Ready Screen TM STAGO:? HITTM DiaMed:? ID-HAT Biotest:? Thrombomatch ? HPA-1a Typing ? HPA-1a Typing 血小板抗原基因型检测PCR-SSP Real-time PCR检测基因型 血小板免疫失调 药物诱发的血小板减少症-DITP 自身免