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- 2019-04-17 发布于贵州
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生物选修1(人教版) 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 要点突破 一、制备培养基 1.配制原则 (1)目的明确:不同微生物需求不同,根据培养目的进行配制。 (2)营养要协调:营养物质的浓度和比例要适宜。 (3)pH要适宜:为维持pH的相对恒定,可在培养基中加入缓冲剂,常用磷酸氢二钾或磷酸二氢钾。 栏目链接 2.培养基的营养成分及功能 栏目链接 ①对异养微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源、能源。 ②一些天然营养物质,如酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液等可为微生物提供生长因子。 ③不同微生物对营养的需求不同,因此,首先根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。 ④营养物质过少不能满足微生物的营养需要,过多对微生物的生长有抑制作用。 栏目链接 例1 下列关于微生物培养基的说法,正确的是 ( ) A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B.凡是碳源都能提供能量 C.除水以外的无机物仅提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量 栏目链接 解析:对异养微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源。CO2是光能自养细菌的碳源,但不能提供能量。CO2和N2是无机物,也是微生物的碳源和氮源。硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨,同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源。 答案:D 栏目链接 ?变式训练 1.不同培养基的具体配方不同,但一般都含(C) A.碳源、磷酸盐和维生素 B.氮源和维生素 C.水、碳源、氮源和无机盐 D.碳元素、氧元素、氢元素、氮元素 二、消毒与灭菌的比较 栏目链接 栏目链接 酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好。原因是浓度过高,菌体表面蛋白质变性过快从而凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌能力减弱。 栏目链接 例2 细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌( ) A.接种针、手、培养基 B.高压锅、手、接种针 C.培养基、手、接种针 D.接种针、手、高压锅 栏目链接 解析:高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备,通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧,可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环、接种针。 答案:C 栏目链接 ?变式训练 2.下列操作与消毒和灭菌无关的是( ) A.接种前用火焰灼烧接种环 B.接种前用酒精擦拭双手 C.将平板倒置,放入培养箱中培养 D.接种在酒精灯的火焰旁完成 解析:A、B、D都是实验操作过程中常用的消毒和灭菌方法。将平板倒置,放入培养箱中培养与消毒、灭菌无关,是为了防止杂菌污染。 答案:C 三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基及纯化大肠杆菌 栏目链接 2.纯化大肠杆菌操作过程中的注意事项 (1)平板划线法中几次灼烧接种环的目的: 栏目链接 (2)稀释涂布平板法操作比较复杂,且各个细节均需保证无菌操作,应特别注意: ①酒精灯与培养皿的距离要适宜。 ②吸管头不要接触其他任何物体。 ③吸管要在酒精灯火焰周围使用。 ④涂布器末端浸在盛有70%酒精的烧杯中,取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃,注意防火。 栏目链接 ①在稀释涂布平板法操作中,每个步骤都要注意无菌操作,以防培养基被污染,影响实验效果。 ②每一稀释倍数菌液都至少要涂布三个平板,作为实验重复,求平均值,若其中有菌落数与其他实验差距悬殊者,应舍弃该实验数据,不进行统计、计算。 ③平板冷凝后,皿盖上会凝结成水珠。凝固后的培养基表面的温度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。 栏目链接 例2 关于平板划线法操作的叙述正确的是( ) A.使用已灭菌的接种环、培养皿,在操作过程中不需要再灭菌 B.打开含菌种的试管,需通过火焰灭菌,取出菌种后,需马上塞上棉塞 C.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线即可 D.最后将平板倒置,放在培养箱中 栏目链接 解析:使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程仍要灭菌;打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌,取出菌种后含菌种的试管需要通过火焰灭菌后再塞好棉塞;将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线后盖上皿盖;最后应将平板倒置,放入培养箱中培养。 答案:D 栏目链接 ?变式训练 3.稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是( ) A.操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释 B.需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面 C.不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落 D.操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理 栏
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