课件：遗传病的诊断和治疗.ppt

第19章 遗传病的预防 第一节、普查 地区、民族、个体等 发育史 生育史 系谱 第二节 遗传筛查 新生儿筛查 携带者检出 第三节 遗传咨询 婚前咨询和体检 生育咨询和体检 评估再发风险 对策和措施 产前诊断适应症 ◆夫妇之一有染色体畸变，特别是平衡易位携带者，或者夫妇染色体正常，但出生过染色体异常的患儿的夫妇； ◆35岁以上的高龄孕妇； ◆夫妇之一有开放性神经管畸形，或出生过这种畸形患儿的夫妇； ◆夫妇之一有先天性代谢缺陷，或出生过这种患儿的夫妇； ◆X连锁遗传病基因携带者孕妇； ◆原因不明的习惯性流产的孕妇； ◆羊水过多的孕妇； ◆夫妇之一有致畸因素接触史的孕妇； ◆具有遗传病家族史，又系近亲婚配的孕妇。 产前诊断主要从三个方面进行： ①遗传物质检查，如染色体检查、基因诊断等； ②生化检查，如特殊蛋白质、酶、代谢底物、中间产物和终产物等； ③物理诊断，如B超、X线、胎儿镜、电子监护等。 获取胎儿组织的常用方法： 1. 羊膜穿刺法 2. 绒毛取样法 3. 脐带穿刺 4. 胎儿镜检查 5. 孕妇外周血胎儿细胞富集 产前诊断的关键是如何获得胎儿细胞 产前诊断方法 羊膜穿刺示意图 羊膜穿刺 绒毛取样示意图 绒毛取样 本章重点内容 掌握染色体检查的适应症 了解遗传病临床诊断方法 了解分子诊断所用技术的原理 了解产前诊断适应症及诊断方法 了解基因治疗策略、途径及方法 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 研究发现，在绝大多数情况下，DNA甲基化所提供的是关闭基因表达的信息，也称沉默信息。如果把基因的表达与关闭比作门的开与合， 那么DNA甲基化就好比一把锁，彻底而长久地关闭基因的表达。那么，小小的甲基化是如何扮演锁的角色的呢？目前有两种模型-阻止转录因子结合与染色质重塑。 另外一种机制是通过改变染色质的结构关闭基因的表达。DNA甲基化可以作为一种初始的沉默信号，召集甲基胞嘧啶结合蛋白MBD，后者又募集组蛋白去乙酰化酶，去掉组蛋白上的乙酰基，增强DNA与组蛋白的紧密结合；同时还能募集组蛋白甲基化酶，把组蛋白甲基化，相当于引入被放大的二级沉默信号， 被甲基化的组蛋白又募集染色质因子，把核小体紧紧地连接起来，最后形成紧密的异染色质结构，彻底关闭基因的表达。 限制性片段长度多态性分析（RFLP） 核酸杂交(Southern)　 聚合酶链反应(PCR) DNA测序　 基因芯片技术 其它常用的技术 （1）PCR-RFLP （2）PCR-ASO （3）PCR-SSCP 分子诊断的基本技术 Southern印迹杂交原理 基因组DNA DNA片段 杂交 结果分析 酶切 探针 Southern流程 Southern blotting BamHI BamHI α2 α1 α2 10 kb 14 kb probe Southern诊断示例：?-地中海贫血 Southern blotting αα/αα αα/α- αα/- - α- /- - - - / - - 14kb 10kb 正常 缺1 缺2 缺3 缺4 Southern诊断结果分析 RFLP原理 RFLP: Restriction Fragment Length Polymorphism 限制性片段长度多态性 Southern-RFLP Mst II识别序列 Mst II 1.2 kb CCTGAGG CCTGTGG probe 1.4 kb x RFLP诊断: 镰状细胞贫血症 0.2 kb THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 1.4 kb 1.2 kb  βΑ/βΑ βΑ/βS βS/βS 正常 镰状 镰状贫血 Southern-RFLP结果分析 PCR原理 Kary Mullis polymer