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第5章; 遗传与变异;形态结构变异
抗原性变异
菌落的变异
毒力变异
耐药性变异;(一)形态结构的变异;(二)菌落变异;(三)毒力变异; BCG:牛型结核杆菌(有毒株)
胆汁-甘油-马铃薯培养
13年,230次传代
减毒株(BCG)
基因型变异:BCG
表型变异:细菌L型;(四)耐药性变异;基因型和表型变异的比较;细菌染色体; (一)细菌染色体:dsDNA,3.2~5×106 bp
复制快:105 bp/min
无组蛋白,无内含子,为连续基因
单倍体:突变后更易表现;(二)质 粒;医学上重要的质粒;质粒DNA的特征; (三)噬菌体(phage);噬菌体吸附大肠杆菌示意图; 2.噬菌体的形态与结构
基本形态: 蝌蚪形、微球形和细杆形
;头部
核心:DNA 或 RNA
衣壳:蛋白质
尾部
蛋白质
与吸附宿主有关;复制;噬菌体感染细菌的结果;(四)转位因子;1. ??入序列(insertion sequence,IS)
是最小的转位因子,长度不超过2kb,不携带任何已知与插入功能无关的基因区域,往往是插入后与插入点附近的序列共同起作用,可能是原细胞正常代谢的调节开关之一。 ;
IS (insertion sequence): 750~1550 bp
两端重复序列,与插入有关
中心序列有转位酶基因;转座子Tn (transposon): 2000~25000 bp
两端为IS
中心序列有与转位无关基因
如:毒素基因、耐药基因等;常见的插入序列和转座子;3. 转座噬菌体
含有与转位功能有关的基因和反向重复序列,可随机整合到宿主菌染色体任何位置,导致宿主菌变异。;说了这么多,严重记不住!;第二节 细菌遗传变异的机制;一 基因突变与损伤后修复;突变(mutation);突变的分子机制(了解);基因突变特点;彷徨试验:随机的、非定向的突变是在接触噬
菌体之前就已发生,噬菌体对突变
仅起筛选而不是诱导作用。;影印试验(replica plating);突变型细菌及其分离:
耐药性突变型 药敏试验
营养缺陷突变型 营养物质筛选
条件致死性突变型 温度敏感试验
发酵阴性突变型 乳糖发酵试验 ;重要的突变株;DNA的损伤修复;基因转移(gene transfer):
外源性的遗传物质由供体菌进入某受 体菌细胞内的过程。
基因重组(recombination):
转移的基因与受体菌DNA整合在一 起,使受体菌获得供体菌某些特性。
细菌的基因转移和重组可通过转化、接合、转导、溶原性转换和细胞融合等方式进行。; 转化(transformation):
受体菌直接摄取供体菌DNA片段并整合到自己的基因组中,从而获得新的遗传性状的过程。;艾弗里等人的实验不仅揭开了“格里菲斯之谜”,并且在世界上第一次证明基因就在DNA上。 ;转化的条件:
(1)转化的DNA片段的分子量要小于1×107,最多不超过10~20个基因。
(2)受体菌只有进入感受态时才能摄取外源DNA。; 影响因素:
供受菌基因型:
同源性;亲缘关系近,转化率高
感受态(competence):
生理活动过程中摄取
转化因子的最佳时期
环境因素:Mg2+、Ca2+等可促进转化;感受态的细菌:
①表面有一种吸附DNA的受体;
②感受态细菌一般出现在对数生长期
的后期(维持几分钟至3~4h)。
细菌的感受态可用人工诱导的转化程序形成。人工感受态的转化系统最适用于质粒和噬菌体的DNA。;转导(transduction)
噬菌体媒介
将供菌DNA转给受菌
分普遍性转导和局限性转导;普遍性转导( generalized transduction);完全转导
外源性DNA片段与受体菌的染色体整合,并随染色体而传代,称完全转导
流产转导
外源性DNA片段游离在胞质中,既不能与受体菌染色体整合,也不能自身复制,称为流产转导 ;;; 局限性转导:温和性噬菌体 ;普遍性转导与局限性转导的区别;接合(conjugation)
通过性菌毛将供菌DNA转给受体菌,受体菌获得供体菌性状;接合性质粒;高频重组菌(High frequency recombinant,
Hfr):F质粒能稳定地被整合
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