急性白血病患者2号染色体错配修复基因连锁微卫星不稳定性研究-临床检验诊断学专业论文.docxVIP

中文摘要急性白血病患者2号染色体错配修复基因 中文摘要 急性白血病患者2号染色体错配修复基因 连锁微卫星不稳定性研究 摘 要 目的 研究急性自血病患者2号染色体错配修复基因连锁微卫星的不稳定 性改变，以推断错配修复基因突变、缺失变化对于急性自血痛发生、发展过程中 的作用与意义。 方法选取急性自血病患者骨髓及口腔黏膜细胞标本各53例，其中急性粒 细胞自血病(AML)33例，急性淋巴细胞白血病(ALL)20侧，另外收集慢性粒细 胞白血病(CML)标本5例，骨髓异常增生综合征(MDS)3例。选取2号染色体 上两个错配修复基因(hMSH2、hPMSl)连锁的四个擞卫星位点(D2s123、 DZsll9、D2s117、D2s115)进行多重PCR扩增，通过聚丙烯硫胺凝腔电泳／银 染，观察擞卫星不稳定性(microsatellite instability，MSI)及杂台性缺失(10ss of heterozygocyte，LOH)发生情况，并进行分析． 结果53啻|l急性自血病患者中，MSI的检出率为69．8％(37／53)，共78啻j 次。hMSH2附近的D2s123，D2s119位点分别有16例122饲发生MSI，发生率 约为30．2％141．5％；其中LOH的发生率分别为9．4％(5／53)，7．5％(4／53)。 与hPMSl基因连锁的D2s117和D2s115两个位点，MSl的检出率为33．9％ (18／53)，39．6蹦(21／53)；其中LOH则分别有7．5％(4／53)和9．4％(5／53)为 阳性。四位点中D2s119位点的不稳定性表达率最高，AML患者中MSI发生率 为36．4％(12／33)，ALL患者为30％(6／20)。此4位点在AML，ALL中的表达 的差别均无统计学意义(查表法)。有2处或2处以上发生MSI(RER+)的有 28侧。4例初发CML均未检到嫩卫星异常改变，而1倒加速期CML出现了3 个位点的MSI。另一例MDS(RAEB-T)检出2位点的不稳定性变化。 讨论 惠性白血病患者2号染色体上两个错配修复基因连啕l徽卫星均可检 测到高频率的MSI和LOH，说明此错配修复基因的突变与急性白血病的发生、 发展有关。多个位点的MSI现象说明惠性白血病的发生是一个多部位、多步骤 染色体突变累积的结果。 关键词 急性白血病；锖鼍修复基因；2号染色体；微卫星不稳定性；杂台 性缺失 研究生：任志华(临床检验诊断学) 导 师：谭齐贤 刘成玉 英文摘要THE 英文摘要 THE ANALYSIS 0F MICROSATELLITE IN— STABILITY LINKED T0 THE MISMATCH RE— PAIR GENE 0N CHROMOSOME 2 IN ACUTE LEUKEMIA ABSTRACT Object we carry Out a study on microsatellite instability 0f the 4 sites linked to hM— SH2 and hPMSl on chromosome 2，in order to find out the role MMRgene pla撕ng in leu— kemias initiation and its progression． Method MSI and LoH in 58 eases of leukemia(including 33 eases of aeLlte myeloblas- tic leukemia(AML)and 20 eases of acute lymphocytic leukemia(ALL)and 5 cases of chronic leukemia(CL))and 3 cases of myelodyspIastic syndrome(MDS)were detected by multiplex-PCR amplification at 4 microsatellites linked tO hMSH2 and hPMSl oft chromo— some 2，gel electrophoresis and argentine dye． Result we detected^_【!弧and LoH in 37 cases out of 53 acute leukemia．the frequen— des of MSI on D2s123／D2s119 are 30．2蹦(16／53)and 41．5％(22／53)respectively，a— mortg those datas。LOH are 9．4％(st53)and 7．5％(4／53)．another tWO mierosatelli