五蛋白质的沉淀反应.DOCVIP

实验五 蛋白质的沉淀反应 一、实验目的 加深对蛋白质的沉淀反应的认识，理解蛋白质沉淀反应的原理。 二、实验原理 蛋白质的水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，这是因为蛋白质颗粒表面带有很多极性基团，如—NH3+，—COO-，—SH，—CONH2等，和水有高度亲和性，当蛋白质与水相遇时，就很容易被蛋白质吸住，在蛋白质颗粒外面形成一层水膜(又称水化层)。水膜的存在使蛋白颗粒相互隔开，颗粒之间不会碰撞而聚成大颗粒。因此蛋白质在溶液中比较稳定而不会沉淀。蛋白质能形成较稳定的亲水胶体的另一个原因，是因为蛋白质颗粒在非等电状态时带有相同电荷，使蛋白质颗粒之间相互排斥，保持一定距离，不致相互凝集沉淀。蛋白质由于带有电荷和水膜，因此在水溶液中形成稳定的胶体。当某些物理化学因素破坏了蛋白质的水膜或中和了蛋白质的电荷，则蛋白质胶体溶液就不稳定而出现沉淀现象。 三、实验器材 1.仪器：试管及试管架、吸管、抽滤瓶、量筒、布氏漏斗。 2.材料：蛋白质。 3.试剂：蛋白质氯化钠溶液、蛋白质溶液、饱和硫酸铵溶液、饱和苦味酸溶液、1%醋酸溶液、1%醋酸铅溶液、1%硫酸铜溶液、1%三氯乙酸溶液、0.5%磺基水杨酸溶液、5%鞣酸溶液、硫酸铵粉末。 四、实验步骤 （一）盐析作用 取1支试管加入3mL 蛋白质氯化钠溶液和3mL 饱和硫酸铵溶液，混匀，静置约10min，球蛋白则沉淀析出。过滤后向滤液中加入硫酸铵粉末，边加边用