惠阳红梨S基因型的鉴定及花粉S基因克隆-森林培育学专业论文.docxVIP

1111111MWmmmm Y184B07J 中高称此新载火等 学位论文原创性声明 本人郑重声明:所是交的论文是本人在导师的指导下独立进行研 究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文 不包含任何其他个人成集体已经发表或撰写的成果作品，也不包含为 获得中南林业科技大学成其他教育机构的学位或证书所使用过的材 料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均巴在文中以明确方 式表明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。 作者签名:冯 d悔 如叶年 4 月l- B 申奇休止料线式营 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定， 同意学校保留并向国家有关部门成机构送交论文的复印件或电子版， 允许论文被查阅或借阅。本人授权中南林业科技大学可以将本学位论 文的全部成部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印 成扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本学位论文属于: 1、 保密口，在年解密后 j运用本授权书。 2、 不保密阻。 (请您在以上相应方框打 ，J) 作者签名:在同耳 加?年 6月 L日 阳疗制 寸年ω!B 惠阳红梨 S 然因吧!的鉴 及花粉 S 摘要 自交不亲和性是植物生殖过程中的…种普遍现象，是在长期1t1化过程中形成 的防止近亲繁殖和物种退化的一种保护机制。梨属于蔷薇科植物，是典刑的配子 体自交不亲和性果树，在自然授粉的情况下座果率低，需要选育配置适宜的授粉 树或采用亲和花粉进行人工授粉以提高产量。惠阳红梨果皮薄果肉脆，果形大， 果心小，是优良的栽培品种和育种材料。本文从确定惠阳红架的自交不亲和性、 分离鉴定 S 幕因型以及花粉 S 某因克陪方面对惠阳红梨进行了研究，为授粉品 种配置及良种选育提供重要的科学依据，以及为梨白交不亲和性的作用机理机制 的进一步研究提供了重要的参考。本研究主要结果如下: 1.惠阳红梨的自交不亲和性的验证。通过在惠阳红梨花苞大营期进行自花 授粉试验，对惠阳红梨进行自交不亲和性检测，健康藩花…月后进行调查，结果 表明，白花授粉座果率仅为 9.23% ，低于30%。证明了惠阳红梨是自交不亲和 品种。 2. 惠阳红梨的S慕因型的确定。采用一对特异引物 PF:5-TGCCTCGCTCTT GAACAA-3和PR:5-AC(AJG)TTCGGCCAAATAAηJ 对惠阳红梨的基因组 DNA 进行PCR扩增，从中分离鉴定了两个新的砂梨 S慕凶，并分别命名为 s o岛70 经 比对分析，在推导的氨基酸水平上， 基因和梨乌 9、也的相似性最高为94%， 高变区有4个氮慕酸楚异; 7基因和西洋梨系统的 8的某因相似性高达 1∞%，徊 由于两种梨处于不同的系统，因此，将其命名为岛，所以确定惠阳红梨的 S基因 型为 与70 3. 梨乌6 基因的基因组全长序列的分离克降。根据马 6 基因问源性最高的乌9， 制基因设计并合成新的特异引物附 :5- TGCCTCGC( 丁IC)C廿GAACAAA丁 -3: 和阿识:5-AGCCGC ACTCTAATA丁?GAA丁 J对惠阳红梨的基因组 DNA 进行 陀R 扩增，从中分离到了一条 874bp 的基因序列，分析显示为 S物基囚的基因组 全长序列，其中 145bp 为内含子序列。 4. 惠阳红梨花粉$攘因的克降。采用分别设计并合成 3对特特异引物AF问1:5 -AGGGACTCG丁?GπTGA盯γ丁忖丁?G丁门丁?-3和AR1:5 丁C刊c.队:AA灿AA刁♂，飞;8脐F协1:5骂 AAG丁CACγγGA (C汀) TGAAACAA3歹:RF1:5-GTGTGTAA丁丁CA丁G丁GCA 惠阳红梨 S在因刑的鉴定及花粉 S基因的克隆 丁GG-3和 RR1:5吓GGAACG忖丁CCCTCAACTC-3，分别对惠阳红梨的基因组 DNA进行陀R扩增，分离鉴定了控制花粉自交不亲和的 3对花粉S填因，分别命 名为 SFBB46-a pha不nSFBB4rapha ，SFBB4矿bEta和 SFBB4rbáa ，SFBB ganma 和 SFBB4rganma 上述花粉 S墓囚的大小分别为 1179bp和 1179bp ，1192bp和 1192bp，1183bp和1183bpo 关键词z 惠阳红梨:自交不亲和性; s-基因型:分离鉴定: 花粉 S 基因 11 惠阳红裂 S在因刑的鉴定及花粉 S慕因的克陪 Abstract Self-in∞mp?ibility，a comm∞ biol句ica phenome1on in a19叫班m，is a1 im阴阳1t prot创ive lllEdla1ism of preva1ti咱 d耐 br创i咱a1d ψ剧创 retrogr，创on tha