活性指导下石见穿抗肿瘤有效成分的分离提取及其体外抗肿瘤作用研究-中西医结合临床医学专业论文.docxVIP

IIlll IIlll 11 Ill t]lll II llllllllll IIl Y1 945375 学号硕士学位论文 (活性指导下石见穿抗肿瘤有效成分的分离 提取及其体外抗肿瘤作用的研究) 作者姓名徐敬宣 申请学位级别临床医学硕士学位 指导教师姓名 钱晓萍教授刘宝瑞教授职 称主任医师 学科专业 中西医结合临床医学 研究方向中西医结合临床肿瘤内科学 学习时间自 2008年09月01日 起至2011年06月30日止 论文提交日期 2011年04月08日 论文答辩日期201 1年05月24日 学位授予单位南京中医药大学 学位类型 临床医学专业硕士学位 原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取 得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或 撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标 明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者(需亲笔)签名：弓§≥夺遑如。年岁月斗日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国 家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京中 医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 保密口，在一年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密曰。 (请在以上方框内打“√”) 学位论文作者(需亲笔)签名《象殇嬗如¨年s月w日 靳瓣 各歹么1渺引衲 南京中医药大学硕士学位论文目录 南京中医药大学硕士学位论文 目录 摘 要 III Abstract ． ．．V 第一部分研究背景 ： 1 背景一中医对肿瘤的认识 l l 祖国医学对于癌症的认识过程 。l 2病因病机 ．．1 3 传统中医药在现代肿瘤治疗中的应用 ．．2 4常用抗肿瘤中药 3 5抗肿瘤中药有效成分研究 一4 6中药抗肿瘤的作用机制研究 。5 背景二石见穿研究概况 。6 l 石见穿化学成分研究概况 一7 2药理作用研究概况 13 3前期工作基础及本课题研究目的 ．1 3 参考文献 ．1 4 第二部分石见穿活性部位体外抗肿瘤作用的实验研究 l 8 1材料与方法 ．1 8 1．1 实验材料 ．1 8 1．2实验方法 ．1 8 1．3统计学方法 1 9 2 结果 20 2．1 不同浓度石见穿各活性部位对同一细胞株的增殖抑制作用 一20 2．2石见穿活性部位作用72h后5株人肿瘤细胞株形态比较 。24 ：； 讨论 ． ． ． ．． ． ．．．． ． ． ． ． ． ． ．．：16 4参考文献 ．27 第三部分石见穿抗肿瘤化学成分的提取分离与鉴定 ．28 1材料、试剂与仪器 ．28 2提取与分离 ．28 3 结构鉴定 ．30 4参考文献 ．3 1 第四部分石见穿中熊果酸体外抗肿瘤作用实验研究 32 l材料与方法 ．32 1．1实验材料 ．32 1．2实验方法 ．32 1．3统计学方法 ．34 目录2实验结果 目录 2实验结果 ．．34 2．1 熊果酸对5株人肿瘤细胞株的体外增殖抑制作用 34 2．2石见穿醇提物、氯仿部位和熊果酸对5株人肿瘤细胞系的体外增殖抑制作用的比较。34 2．3 熊果酸作用72h后5株人肿瘤细胞系细胞形态比较 35 3 讨论 35 4参考文献 ．38 附录 ．．40 文献综述 ．40 化合物核磁图谱 。49 硕士在读期间取得的成果 50 弼C谢 5 1 Ⅱ 位。方法：使用95％I业酒精对石见穿饮片进行提取，然后分别用石油醚、乙酸乙酯、氯 位。方法：使用95％I业酒精对石见穿饮片进行提取，然后分别用石油醚、乙酸乙酯、氯 仿和正丁醇依次对乙醇提取部位进行分段萃取，采用MTT法(四甲基偶氮唑蓝比色试验) 测定各个提取部位对体外培养的5株人肿瘤细胞的增殖抑制作用。结果：在体外，氯仿部 位和乙酸乙酯部位对于5株人肿瘤细胞株具有较强的增殖抑制作用。结论：氯仿部位是石 见穿发挥体外抗肿瘤作用的主要活性部位。 关键词： 石见穿；活性部位；MTT法；体外抗肿瘤作用 第二部分石见穿抗肿瘤活性部位化学成分的分离与鉴定 目的：研究石见穿(Salvia chinensis beth．)抗肿瘤活性部位的化学成分，阐明其药物 作用的物质基础。方法采用溶剂萃取、硅胶柱色谱和制备型硅胶板分离纯化，根据理化 性质和波谱学数据鉴定化合物结构。结果：从石见穿的氯仿部位分离鉴定了4个化合物， 分别为：熊果酸(ursolic acid A)、p-谷甾醇(p