《动物细胞培养》参考课件.pptVIP

动物细胞培养 问题讨论 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？ 取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植。 动物细胞培养 请同学们阅读课本后，简述动物细胞培养的基本过程？ 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 胰蛋白酶 剪碎 单个细胞 加培养液 制成 细胞悬浮液 原代培养 细胞增殖 部分细胞无限传代 去掉组织间蛋白 动物细胞培养不能 最终培养成生物体 传代培养 动物细胞培养 请总结出动物细胞培养的定义 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 思考题 1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？ 2、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗？ 3、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？ 4、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？ 5、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？ 没有 是 成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖 先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理 胰蛋白酶水解蛋白质 细胞间的成份是蛋白质 思考题 6、细胞膜的主要成份是什么？ 7、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 8、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？ 9、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 10、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官，请解释原因？ 蛋白质和磷脂 能 注意时间的控制 不能，因为酶的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近 胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛 思考题 11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？ 12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？ 13、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？ 易于培养细胞贴壁，进行生长增殖 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。 将贴壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后继续增殖。 这样的过程叫做传代培养 思考题 14、如何理解原代培养和传代培养？ 15、传代培养的细胞能一直传代下去吗？ 16、有些为何能一直传下去吗？ 17、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗？ 18、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？ 上述过程中，在第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养 不都能 发生突变，朝着癌细胞方向发展 不是 保存10代以内的细胞，因为10－50部分细胞的细胞核型可能发生变化，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的知识，认为体培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢？ 思考题 无菌、无毒 全部的营养物质 适宜的温度和PH值 必要的气体条件 动物细胞培养条件： 1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等） 3、温度和PH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 保证细胞顺利的生长增殖 获得细胞 细胞的全能性 植物体 培养结果 或细胞产物 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物细胞和动物细胞培养的比较 细胞群体 请举出动物细胞培养应用的实例 动物细胞培养应用 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体） 作为基因工程中的受体细胞 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据 原代培养和传代培养 从机体上获取的组织，通过酶或机械方法分散成单个细胞进行培养，在首次传代前的培养一般称为原代培养（初代培养）。 原代培养的最大优点是：组织细胞刚脱离机体，生物性状尚未发生较大变化，在一定程度上能够反映体内的状态。 原代培养的细胞在生长、繁殖一定时间后，由于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭，会影响细胞的生长，因此需要进行扩大培养，即传代或称为传代培养（继带培养），也就是将细胞按1:2～1:4的比例传代 但严格说来，不论在进行传代时稀释与否，将细胞从一个培养瓶转移到另一个培养瓶即称为传代培养。 关于传代培养 在进行传代时，如果是悬浮细胞，只需简单稀释即可，若需完全更换培养液只需低速离心沉淀，再悬浮于合适的培养液中即可。一般细胞每