脊髓损伤后慢性中枢性疼痛的WDR神经元机制-基础医学专业论文.docxVIP

史j|||I协和匡型盔堂J堕堕墨堂主些里些望苎 史j|||I协和匡型盔堂J堕堕墨堂主些里些望苎 三 缩略词表 ALS anterolateral system 前外侧束系统 CCP chronic central pain 慢性中枢性疼痛 DCⅣ匝 dorsal column medial lemniscus 背柱内侧丘系 DRG dorsal root ganglion 背根节 DS difference score 左右腿抬腿潜伏期 差值 GABA Y-aminobutyric acid Y氨基丁酸 L丁P long—term potentiation 长程放电 NE norepinephrine 去甲肾上腺素 NGF nerve growth factor 神经生长因子 NⅣ[DA N-methyl—D—aspartate N一甲基一D一天(门) 冬氨酸 PWL paw withdrawal latency 抬腿潜伏期 SCI spinal cord injury 脊髓损伤 SMP sympathetic maintained pain 交感依赖性疼痛 SPG sucrose，potassium phosphate monobasix， glyoxylic acid monohyrdride 乙醛酸染液 SSC sympathetic-sensory coupling 交感感觉偶联 TH tyrosine hydroxylase 酪氨酸羟化酶 ⅥrDR wide dynamic range 广动力范围神经元 中国协和医科大学必匡堂童些望些鲨塞 中国协和医科大学必匡堂童些望些鲨塞 三 摘 要 研究背景：慢性中枢性疼痛综合征(Chronic Central Pain，CCP) 是脊髓损伤(Spinal Cord Injury，SCI)引起的一个灾难性的后果， 包括幻肢痛、自发性疼痛、痛觉过敏及感觉异常等，严重影响患者的 生活质量。由于对SCI后CCP产生的机制还不完全了解，故目前尚无 既有效又安全的治疗方法。对脊髓部分损伤的研究发现，损伤下游节 段背角广动力范围(Wide Dynamic Range，WDR)神经元兴奋性增加， 推测该神经元的功能改变可能是CCP产生的脊髓机制。对于脊髓完全 性损伤(例如脊髓横断损伤)而言，损伤下游脊髓的传入与上游脊髓 及脊髓以上中枢的联系被完全切断，此时损伤下游脊髓神经元的功能 改变对将来CCP的发生应该意义不大。从结构上看，在脊髓水平最有 可能与将来CCP的产生相关的应该是损伤上游的背角神经元，但目前 尚无研究说明该部位WDR神经元在脊髓横断后CCP中的作用。已知外 周神经损伤后，相应背根节(Dorsal Root Ganglia，DRG)内出现异 常的交感节后纤维芽生并包绕神经元形成“篮状细胞”，这是“交感 一感觉偶联”的解剖学基础，反应交感神经系统可以促进慢性痛的产 生。中枢神经系统损伤后是否脊髓内也存在类似于DRG的交感异常增 牛，目前也未见报道。神经系统损伤后，在损伤部位立即会产生一连 串的放电，称为损伤放电(injury discharge)。研究发现，起源于 外阁神经损伤部位的损伤放电可以驱动脊髓内中枢敏感化的发生。中 枢神经系统损伤后，损伤放电对将来中枢敏感化和CCP的发生是否也 中国协和医科大学临床医学专业毕业论文 中国协和医科大学临床医学专业毕业论文 兰 存在驱动作用尚不得知。本研究利用脊髓横断模型，探索：1)损伤 节段上游WDR神经元的功能改变及其意义；2)损伤上游脊髓内是否 存在交感异常增生；3)脊髓损伤后损伤放电对将来中枢敏感化和CCP 的作用。研究方法：1)在L6一S1脊髓横断术前和术后第五周测定动 物对同一机械、热和冷刺激的反应，观察手术后动物的行为学改变： 2)使用细胞外记录的方法，在脊髓横断术后第五周记录损伤节段上 游WDR神经元的电活动，观察其兴奋性的改变；3)采用乙醛酸荧光 染色技术，观察脊髓横断术后第五周损伤上游脊髓内交感节后纤维芽 生的情况；4)脊髓横断后立即于损伤处施加50mg布比卡因(一种 Na+通道阻断剂)粉剂以抑制损伤放电，分别进行上述1)--3)的实 验步骤，观察损伤放电被抑制后动物行为学、电生理学和组织形态学 的改变。结果：1)脊髓横断后第五周，手术组(单纯脊髓横断)明 显产生了对机械、热和冷刺激的痛性感觉异常(allodynia)，而假手 术对照组和布比卡因组对机械、热和冷刺激的反应与术前相似，都不 产生痛性感觉异常；2)术后第五周，手术组动物损伤上游脊髓背角 WDR神经元兴奋性比对照组和布比卡因组明显增加，表现在白发放电 的神经元比例增加、自发放电的频率增加、晚成分出现所需的阈值降 低、晚成分放电个数增加、晚成分出现的潜伏