生物化学 第三节核酸内容资料.pptVIP

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Reverse transcription;1. mRNA 的结构和功能;次黄嘌呤核苷 (I);DHU 环;tRNA 的三级结构 倒 L 形; 构成核苷酸的主要碱基;碱基的紫外吸收性质;DNA 变性的本质是 DNA 双链间氢键的断裂。;DNA的融解温度(melting temperature) DNA的变性作用发生在一个相当窄的温度范围内,通常将A260达到最大值的一半时的温度称为DNA的融解温度(melting temperature),以Tm表示。 Tm值计算公式为: Tm=69.3+41(G+C)% ,少于20个碱基的寡核苷酸的Tm=4(G+C)+2(A+T) ;(二)复性与杂交 变性DNA在适当条件下,两条互补的单链重新缔合,恢复天然的双螺旋结构,这个过程称为复性(renaturation) 将不同来源的DNA分子放在同一溶液里,经热变性后缓慢冷却,使其复性。若这些变性的DNA单链之间在某些区域有碱基互补的序列,则复性时,它们之间会形成双链,该过程称为核酸分子杂交(hybridization) ;复性过程中的碱基配对;一、核酶 ; 核酶的结构有一定的规律:根据其一级结构绘出的二级结构中,有许多RNA分子内部碱基配对形成的局部双链区,这是RNA具有催化作用的结构依据。其中一个最简单且最具有代表性的结构就是锤头结构(hammerhead structure)。;图1-19 锤头核酶二级结构示意图 N表示任意碱基,N表示与其互补的碱基, X表示除G以外的任何碱基, A、G、C、U表示一致性序列;二、脱氧核酶;核酶与脱氧核酶的研究意义;第六节 基因组学与人类基因组计划; 基因(gene)是指位于染色体的特定位置、编码特异的蛋白质或RNA的一段核酸序列(通常是DNA序列),是遗传物质的结构和功能单位。 基因组(genome)代表了一个生物细胞内的全部基因和染色体组成。; 基因组学(Genomics),指对所有基因进行基因组作图(包括遗传图谱、物理图谱、转录图谱),核苷酸序列分析,基因定位和基因功能分析的一门科学。 基因组学包括两方面的内容:以全基因组测序为目标的结构基因组学(structural genomics)和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学(functional genomics)。;人类基因组计划 (human genome project,HGP);人类基因组计划的出现;癌症研究的转折点——人类基因组的全序列分析 Renato Dulbecco, Science 1986;HGP的研究目标及内容;人类基因组作图;物理图谱 物理图谱(physical map)指DNA序列上两点之间的实际距离。其目标是在基因组中每100kb设一个标志点(即“路标”),目前最满意的是以已定位的DNA序列STS(sequencing tagged site,序列标记位点)作为“路标”,以DNA的实际长度(bp,kb,Mb)为“图距”绘制物理图谱。物理图谱是进行DNA序列分析和基因组织结构研究的基础。;转录图谱 转录图谱(transcription map)又称cDNA(complementary DNA)计划,是以表达序列标签(expression sequence tag,EST)为标志绘制的图谱。在获得足够多的EST序列后,对这些EST片段进行染色体定位,最终绘制成一张可表达的基因图——转录图谱。有了这张转录图谱,我们就可以了解不同基因在不同的时间、不同组织的表达情况;以及正常与异常状况下基因表达的差异。来自不同组织和器官的EST可为基因的功能研究提供有价值的信息,为基因鉴定提供候选基因。;基因组序列分析 人类基因组计划最终要测定出由3×109 bp核苷酸组成的人基因组DNA的全部序列。随着全新测序技术与策略的参与,这项工作的进度大大加快,已远远超越了原定计划的时间表。;人类基因组计划的步伐;人类基因组计划的步伐;人类基因组计划的步伐;人类基因组计划的研究价值;下一阶段:后基因组研究;真核生物基因组的特点;真核生物基因组的特点;基因重叠 病毒基因组具有重叠基因(overlapping gene)的结构,即多个基因在同一DNA分子上部分或完全重叠,该DNA序列能够编码两种甚至三种蛋白质分子;而真核基因组及细菌的基因组没有这种结构。;DNA;真核生物基因组的特点;DNA;DNA;DNA;真核生物基因组的特

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