喜树及其相 关生物技术学科介绍课程讲述.pptVIP

喜树及其相关的生物技术;;; 喜树亦可作庭荫树、行道树，主干通直，树冠宽展，本种生长迅速，为优良的庭园树和行道树，可作为绿化城市和庭园的优良树种。且其为我国特有。分布于长江以南、海拔1000m以下的林边和溪边。是【国家Ⅱ级重点保护野生植物】：（国务院1999年8月4日批准）;喜树果 果实披针形，长2～2.5cm，宽5～7mm，先端尖，有柱头残基；基部变狭，可见着生在花盘上的椭圆形凹点痕，两边有翅。表面棕色至棕黑色，微有光泽，有纵皱纹，有时可见数条角棱和黑色斑点。质韧，不易折断，断面纤维性，内有种子1粒，干缩成细条状。味苦。 ;【化学成分】：含喜树碱、喜树次碱、10-羟基喜树碱、10-甲氧基喜树碱、白桦脂酸、长春甙内酰胺等。 ;二、喜树碱; ; 喜树碱的衍生物10-羟基喜树碱的抗癌活性超过喜树碱，对肝癌和头颈部癌也有明显疗??? ，而且副作用较少。它主要作用于S期，对G1期、G2期、M期细胞有轻微的杀伤力，对G0期细胞无作用。通过抑制DNA拓扑异构酶I（TopoI）而阻碍DNA复制，使DNA链不可逆破坏，从而导致细胞死亡。 ;三、与喜树相关的生物技术;喜树的多倍体诱导研究;结果与分析：;得到经过多倍体诱导的枝条或各种形式的嵌合体植株。; 对叶片进行切片观察，发现经过秋水仙素溶液处理过的叶片叶脉增多，撅取叶片下表皮在显微镜下观察，可见单位面积内的气孔数目减少，但每个气孔的直径增大。 ; 从上表可以看出，经过秋水仙素处理的喜树种子萌发后形成的植物具有明显的多倍体特征，而对于多倍体，由染色体上基因调控的有效化学成分含量往往比正常二倍体高。;转基因提高喜树愈伤组织中喜树碱含量;步骤：;利用所构建的根癌农杆菌菌株转化喜树细胞，获得经PCR检测的转基因愈伤组织； ;Cu2+诱导刺激对喜树悬浮培养细胞喜树碱生物合成的影响;结果与分析：;0．5μmoL／L的最终Cu2+浓度在第8天加入时可使细胞干重达到最大值，同时也诱导喜树碱的积累，而40．0μmol／L的最终Cu2+浓度在第18天加入时可获得喜树碱的最大产量。;高浓度的Cu2+主要作为诱导子而起作用，而且在培养的中后期，即次生代谢产物开始大量合成的时期加入最有效。通过不同细胞生长时间段的重复刺激，即早期添加Cu2+主要作为营养因子，中后期添加Cu2+主要作为诱导子，这样既可以显著地促进喜树碱的积累，又可以不影响细胞的生长。;;喜树碱生物合成途径及其代谢调控、相关酶等的研究进展;四、展望