环境因素对植物细胞微核率及热激蛋白诱导的研究-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

⑧ 硕士学位论文MA朝[ER’S TIIES[S摘要随着科技进步、工业发展以及人们生活水平的提高，环境问题日益加剧， 其危害性可归为三类：致畸、致癌、致突变性，称为三致性，而三致性的根本 又在于致突变性，致畸、致癌常常是致突变的结果。因此，检测环境中的各种 具致突变性的因素以及物质一直是众多生物学者的研究热点。蚕豆微核技术即 是一种较有效的致突变性检测手段之一。另外，由于环境对生物的负面影响， 生物本身为了生存必须适应环境，在其长期的进化长河中逐步获得了一系列的 适应机制来消除或部分减轻这些不良影响，而热激蛋白就是生物在受到环境胁 迫时产生的并能帮助细胞免受胁迫伤害的一类蛋白质。本实验即主要以蚕豆为 材料研究了重金属cr”与高温两种常见环境因素对蚕豆根尖细胞微核率的影 响，以大麦为材料初步探讨了温度对植物叶片热激蛋白的诱导，并摸索了一套 比较经济且方便的植物叶片可溶性蛋白双向电泳的方法。1．环境对蚕豆根尖细胞微核率的影响利用蚕豆根尖细胞微核技术比较研究了Cr“和温度对植物根尖细胞微核 率的影响，证实了温度和Cr”等重金属一样，也可以对蚕豆根尖细胞的细胞核 和染色体产生影响，其遗传学毒理效应与危害性也相似。当处理温度在 28℃一34℃之间递增时，蚕豆根尖的微核率虽然变化不大，不过仍然呈现递增关系，而当温度在37℃一43。C递增，则呈现很明显的递增关系：但当温度升高到46℃以后，其微核率却反而降低。这与Cr”和蚕豆根尖细胞微核率以及以往 的相关实验结果都相吻合。2．蚕豆叶片可溶性蛋白提取及双向电泳以蚕豆叶片为材料，探讨了植物叶片可溶性蛋白在提取、双向电泳中的 等电聚焦、平衡以及固定染色方面的一些改进，并通过银染得到了清晰的双向 电泳图谱，从图中可肉眼观察到300多个清晰的蛋白斑点，等电点多在4—7之 间，分子量在14—100kDa之间。⑧ 硕士学位论文MJkSTEIk’S THESIS3．温度对大麦叶片热激蛋白的诱导以大麦叶片为材料，利用35S-Met作为蛋白标记，通过对双向电泳中等电 聚焦后的凝胶pH值的测定，结合双向电泳图谱，简单地分析了双向电泳的分 辨能力与等电聚焦后的凝胶中的pH梯度之间的关系：并通过SDS着重研 究了大麦叶片在黑暗和光照的条件下诱导热激蛋白强度的差异。结果表明，凝 胶在pH值6—8．4区间，其pH值与pH值测定点间的距离成直线关系，形成了 良好的pH梯度，所以此区间对蛋白质的分离效果最佳，分辨能力也最强。除 此，本实验首次发现在相同的温度热激处理下，植物在黑暗条件下的热激反应 比光照下要强烈，热激蛋白的合成量也更多一些，其机理尚待进一步研究。关键词： 蚕豆根尖细胞微核技术热激蛋白环境监测 双向凝胶电泳等电聚焦⑧ 硕士学位论文MASTER’S THESISAbstractFollowing the progress of science and technology，the development of industry and the improvement of standard of people’s liring，the problems of environment prick up increasingly．The imperils can turn to three kinds：aberration，carcinogen and mutant．And the root of them rest with mutant，because both aberration and carcinogen often result from mutant．Thus,menitoring a11 kinds of mutant factors and materialsin our environment is always the study hotspot by many biologists．Vicia mieronucleus technology is just one of rather efficient measures of monitoring mutagens．In the other hand，because of the negative effects on the organisms by the surroundings，they themselves have to adapt to live．So they have tried to acquire a series of adaption mechanism to avoid or partly alleviate the bad effects step by step during the long evolut