环境友好前处理技术检测动物源性食品中兽药残留的研究与应用-分析化学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 烟台大学学位论文原创性声明和使用授权说明 原创性声明 本人郑重声明： 所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工 作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体 已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已 在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。 论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文使用授权说明 本人完全了解烟台大学关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：按照学校 要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存学位论文的印刷本和电子版， 并提供目录检索与阅览服务；学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保 存论文；在非保密的论文范围内，学校可以公布论文的部分或全部内容。 （保密论文在解密后遵守此规定） 论文作者签名： 导师签名： 日期： 年 月 日 烟台大学硕士学 烟台大学硕士学位论文 摘要 动物源性食品与人们的生活息息相关，其质量安全问题更是受到各国政府和食品安全机 构的广泛关注，而兽药残留是导致动物源性食品安全性下降的重要因素之一。因此，兽药残 留分析成为亟待解决的重要课题。 动物源性食品中兽药残留的分析主要包括兽药的提取和检测，当代分析仪器已经能够满 足各类化合物的测定要求，因此制约动物源性食品中兽药残留检测的关键是样品前处理技 术。论文对现有动物源性食品中兽药的提取技术进行了综述，并期望探索新的环境友好前处 理技术。以分子荧光光谱法和平衡透析法分别详细研究了二苯乙烯类激素与牛血清白蛋白 （BSA）、二苯乙烯类激素与实际样品之间的结合作用，阐明了待测药物在实际样品中的存 在状态，为食品中兽药残留的提取提供了理论依据。结合乙醇-K2HPO4-水双水相体系、有机 水溶液提取法、弱酸水溶液提取法与高效液相色谱（HPLC）检测技术，建立了检测动物源 性食品中二苯乙烯类激素、喹诺酮类抗生素（QNs）和四环素类抗生素（TCs）的方法。 论文主要分为五部分： 第一部分：综述了动物源性食品的安全状况及兽药残留的危害，概述了动物源性食品兽 药残留的检测方法和常用的前处理技术，阐明了本论文的研究意义和内容。 第二部分：应用分子荧光光谱法研究了二苯乙烯类激素(己烷雌酚、己烯雌酚和双烯雌 酚)与 BSA 的结合作用，进一步利用平衡透析法研究了二苯乙烯类激素与实际牛奶样品的结 合率，同时详细讨论了蛋白质对提取牛奶样品中二苯乙烯类激素残留的影响。结果表明，二 苯乙烯类激素与牛奶样品具有较强结合作用，而体积分数为 70%的乙醇水溶液可引起蛋白质 缓慢变性、伸展，充分离解与其结合的二苯乙烯类激素，向上述体系中加入适量 K2HPO4 盐后形成双水相体系，脂溶性的二苯乙烯类激素残留可进入双水相体系上相，实现药物残留 的均相高效萃取与基质去除。由于体积分数为 70%的乙醇水溶液的极性较大，萃取液中的脂 溶性杂质比常用的疏水溶剂液液萃取体系中少，所以本实验无需后续净化步骤，应用高效液 相色谱（HPLC）测定。实验提出的样品前处理方法用于牛奶中三种二苯乙烯类激素的快速 测定，取得满意结果，回收率为 83.2%～93.8%，相对标准偏差低于 4.5%，检出限为 11.7～ 20.7 ng·g-1，样品前处理方法步骤简单，高效，经济，绿色环保，为药物检测提供了一个新 的有效方法。 I 万方数据 万方数据 第三部分：结合液相色谱检测技术，建立了一种环境友好型检测牛肉、猪肉、鱼肉中三 种二苯乙烯类激素的方法。运用平衡透析法研究了药物与肉样之间的强结合作用，同时运用 瑞利散射光谱和 HPLC 研究了蛋白质对提取三种二苯乙烯类激素的影响。实验结果表明，药 物与蛋白质之间的强结合作用可以降低从肉样中提取二苯乙烯类激素的提取率。以体积分数 为 80%的乙醇水溶液作为提取试剂时，肉样中的蛋白质会发生缓慢且完全的变性，释放出与 蛋白质结合的二苯乙烯类激素药物，进而得到较高的提取率。由于 80%的乙醇水溶液极性较 大，提取液中的脂溶性杂质很少，在提取液中加入少量的 PSA（N-丙基乙二胺修饰的硅胶） 粉末即可达到满意的净化效果，大大简化了样品溶液的后续净化步骤。实验提出的样品前处 理方法简单高效，环境友好，通过减慢蛋白质的变性速度，使与蛋白质结合的药物充分释放 到提取液中，达到提高药物提取率的效果。本法应用于牛肉、猪肉、鱼肉中二苯乙烯类激素 的测定，结果令人满意，回收率均在 81.4%~98.1%之间，RSD 值为 1.3 %~ 4.8%。 第四部分：建立了一种环境友好型、同时分离、检测牛奶中六种喹诺酮类药物（依诺沙 星，诺氟沙星，环丙沙星，洛美沙星，恩诺沙星，加替沙星）的高效液相色谱分析法。方法 采用反相 Chromatorex C18 色谱柱，二极管阵列检测器，检测