天然LFA-3对于猪血清溶血作用和猪PBMCEt花环的影响.PDF

维普资讯 7l ，1 第2o卷 第3期 西北农业大学学报 Vo1．20 NO．3 1992年8月 ActaUniv．Agric．Boreali—occidentalis Aug I992 天然 LFA一3对于猪血清溶血作用和 猪 PBMCEt花环的影响 肖俊杰 陈德 赵友琴 — — — — _ _ _ 一 - ● - _ _ _ 一 (西北农业大学动物病毒病研究室 陕 西杨陵 ·7】2Joo) ● 摘 要 根据解离、吸收猪血清能啦阻止正常猪血清对 SRBC的破坏作用和褚印MCE 花环的形成，推断正常猪血清中存在天然的LFA一3 并从天然LFA一3与游离c 和膜CD2 ’ 的可能关系中提出了T淋巴细胞激活中糌离CD2谰控途径的设想 关键词 猪 游离 CD LFA一3、血清学，溶血 中田分类号 $852．53 CD，的配体(淋巴细胞功能相关抗原一3、LFA一3)除公认为绵羊红细胞(SRBC)~ 面 糖肽外 ，还发现 自身红细胞 (RBC)、淋 巴细胞及上皮细胞等表面也有 LFA-3存 在 “。探索 自身LFA一3与CD，结合后引起动物机体免疫反应的可能变化，将是研究 体内游离 CD，生理功能的重要途径和方法。然而血液及其他体液中有无天然 LFA-3 存在，迄今尚未得到实验证实。本研究在设想血液和其他体液中的LFA一3可能与其中 的游离CD，相结合存在的基础上+以解离和经 SRBC吸收除去游离CD，的猪血清作为 天然 LFA-3，进行了正常猪血清溶血抑制试验和猪外周血单个核细胞(PBMC)E，花环 抑制试验，探索 了猪血清中LFA一3的存在。 1 材料和方法 1．1 试验猪血清 采 白屠宰前的成年健康猪，血清分离后置 4E：保存，供 5d内使用。 1．2 试验猪 ● 为 2～3月龄杂种仔猪，测温、观察证明健康后，供采集 PBMC． 1_3 SRBC悬液的制备 颈静脉采集抗凝血，以无菌生理盐水洗涤 3次，所得 SRBC泥部分用 于血清吸 收，部分以生理盐水和Hanks液分别配成 5％和 1％的悬液，供溶血试验和 花环试 验用 1．4 经反复解离和 SRBC吸收猪血清(下称天然LFA一3) 正常猪血清经流水透析 4h后，转入 4℃继续以生理盐水透析 44h(中间换液 6～8 次)，然后加入 1／10(v／v)的 SRBC，室温振荡吸收 15min，离心除去 SRBC后，于 37E搅拌使血清内可能存在的游离 CD，与LFA-3的结合物解离，并即刻加入SRBC，室 温振荡吸收 15min，经解离．吸收 3次后所得上清部分即为 LFA一3，供当日使用。 文稿收到 日期；199卜09—13 维普资讯 72 西北农业大学学报 第 20卷 1．5 RBC振荡对腰液(下称 RBC对照液) 向生理盐水加入 l／l0(v／v)SRBC，室温振荡 15min，离心弃去 RBC后再加入 l／10SRBC，重复加入SRBC和室温振荡 3次