淀粉利用性保加利亚乳酸菌之育种.DOC

澱粉利用性保加利亞乳酸菌之育種 Breeding of Lactobacillus bulgaricus for starch utilization 研究生： HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=%E9%99%B3%E5%8B%87%E6%99%BAfield=AU HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=%E7%8E%8B%E6%83%A0%E5%A6%82field=AU 王惠如 HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=Hui-Ju%2C+Wangfield=AU Hui-Ju, Wang 指導教授： HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=%E9%84%A7%E5%BE%B7%E8%B1%90+%E5%8D%9A%E5%A3%ABfield=AD 鄧德豐 博士 ; HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=%E8%AC%9D%E5%AF%B6%E5%85%A8+%E5%8D%9A%E5%A3%ABfield=AD 謝寶全 博士 HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=Der-Feng%2C+Dentfield=AD Der-Feng, Dent ; HYPERLINK .tw/theabs/site/sh/search_result.jsp?hot_query=Pao-chuan%2C+Heishfield=AD Pao-chuan, Heish 【摘要】 澱粉利用性保加利亞乳酸菌之育種，在本實驗是利用lysozyme來製備保加利亞乳酸菌之原生質體，與芥藍菜之葉綠體，在含有氯化鈣和聚乙二醇之條件下進行融合，然後於再生培養基上篩選出能利用澱粉的乳酸菌融合株，再進行融合株之生理特性探討。如此取得之融合株不僅對澱粉具有利用性，對其他碳源方面，也比親株(Lactobacillus bulgaricus)增加對potato starch、dulcitol、melezitose、a-methyl-D-glucoside、raffinose、rhamnose、sucrose、salicin、sorbitol、trehalose、ribitol、mannitol、xylitol等之利用能力。在氮源利用性方面，比親株增加對(NH4)2HPO4和casamino acid等之利用性。另外嘗試將融合株應用在豆漿的發酵上，結果發現在豆漿中培養16小時後可使豆漿凝固，融合株在無糖豆漿及各別添加1% glucose、1% potato starch、1% 脫脂乳等之豆漿中，各別所得 到之產酸量分別為0.56%、0.79%、0.77%、0.9%。另外，融合株對於環戊烷、十二烷、正庚烷、十六烷、正己烷、異戊烷、煤油、癸烷、壬烷、辛烷、十一烷、異辛烷、十四烷等碳氫化合物具有利用性。融合株最適生長條件為：3% 馬鈴薯澱粉、4% 酵母抽出物、pH 6.5、37℃下，100 rpm振盪培養。融合株最適產酸條件為：3% 馬鈴薯澱粉、4% 酵母抽出物、pH 8.0、37℃下靜置培養。融合株對澱粉之分解活性會隨著前培養的時間增長而增強，且比枯草菌之生產能力強，所產生之澱粉分解酵素為胞外酵素。關鍵字:保加利亞菌, 原生質體, 融合, 融合株 【Abstract】 Breeding of Lactobacillus bulgaricus was performed by protoplast fusion to enhance its starch utilization ability. Protoplast of L. bulgaricus was prepared by lysozyme and fused with the chloroplast of Brassica alboglabra Bail. The protoplast and chloroplast were fused in the presence of CaCl2 and polyethyleneglycol (PEG) 4000. The Fused cells were grown on a regeneration medium and then the acid producing fusant was selected