药理学动物实验基本方法资料课件.pptVIP

药理学动物实验基本方法;Contents;大鼠;小鼠的捉持;大鼠的捉持;豚鼠的捉持;兔的捉持;犬的捉持;灌胃给药——大小鼠;灌胃给药——兔;皮下注射给药——大小鼠;静脉注射给药——大小鼠;静脉注射给药——犬;静脉注射给药——兔;二、实验动物的采血 ;方法：固定动物并露出鼠尾，将尾部在45℃的温水中浸泡数分钟（或以二甲苯棉球涂擦），使尾部血管扩张。将鼠尾擦干，用锐器切去尾尖0.3～0.5cm，让血液滴入盛器或直接以血红蛋白吸管吸取。 对象：大、小鼠 特点：小量采血，可以多次采血。 ;方法：用左手捉鼠，拇指及中指抓住头颈部皮肤，食指按于眼后，使眼球轻度突出，眼底球后静脉丛淤血。右手持取内径为1.0-1.5mm的玻璃毛细管（临用前折断成1-1.5cm长的毛细管段，浸入1％肝素溶液中，干燥后用）刺入深度小鼠2～3mm，大鼠4～5mm。当感到有阻力时再稍后退，得到所需要的血量后，拔出。 对象：大、小鼠等。 特点：中等血量（0.2～0.3ml，小鼠；0.5～1.0ml，大白鼠），避免动物死亡。;方法：左手以拇指和食指保持动物的头颈部，使其头略下倾，右手持剪刀猛力剪断鼠颈，让血液滴入盛器。 对象：大、小鼠等。 特点：需要血量较大（小白鼠可采血0.8～1.0ml，大白鼠可采血5.0～8.0ml） ，且不需要继续保存动物生命时用本法。;方法：动物要麻醉后进行，用针管在腹主动脉分叉处，与血管平行刺入。 对象：大、小鼠等。 特点：需要血量较大，且不需要继续保存动物生命时用本法。;方法：将动物背位固定，在左胸第2至第4肋间剪毛一块，用碘酒和酒精消毒。然后用配有7号针头的10ml注射器，在心跳最明显处作穿刺。针头刺入心脏后即见血液流入注射器；或边刺边抽，直至血液流入注射器。取得所需血量后，迅速将针头拔出，这样心肌上的穿刺孔较易闭合。 对象：兔、豚鼠等。 特点：采血量较大，继续保存动物生命。;方法：将家兔放在固定箱内，剪去拟采血耳壳上的毛，用电灯照射加热或用二甲苯棉球涂擦耳壳，使耳部血管扩张。用粗针头刺破耳缘静脉或以刀片在血管上切一小口，让血液自然流出，滴入已放有抗凝剂的盛器中。采血完毕，用干棉球压住出血口，以待止血。如一时不易止血，可用木夹夹住耳壳10～20分钟。 对象：犬——在前肢静脉、后肢小隐静脉采血；小型猪——为耳大静脉、后肢静脉 特点：采血量较大，继续保存动物生命。;三、实验动物编号与分组; 方法步骤： (1)涂染原则：从左到右、从上到下。 (2)左前肢为l号、左侧腹部2号、 左后肢3号。 (3)两耳后部4号、背中部5号、 后肢背部6号。 (4)右前肢7号、 右侧腹部8号、 右后肢9号。 (5)尾巴根为10号。 （6）额部为20号; 2、双色涂染法： 在每组动物不超过100只的情况下用。 实验动物：大鼠、小鼠。 常用染色剂： (1)3-5％苦味酸溶液，可染成黄色。 ——作为“个”位数。 (2) 0.5%中性红或品红溶液，可染 成红色。——作为“十”位数。 ;方法步骤： (1) 用两种颜色同时进行染色标记。 (2) 用苦味酸(黄色)染色标记作为个位数。 (3) 用品红(红色)染色标记作为十位数， （4）左前肢为10号、 左侧腹部20号、 左后肢30号， 两耳后部40号、 背部50号、 后肢背部60号， 右前肢70号、 右侧腹部 80号、 右后肢90号 第100号不作染色标记。 ;3、穿耳孔法 用专用耳空器在动物耳朵不同部位打一小孔或缺口表示一定号码的方法，原则是：左耳代表十位，右耳代表个位。实验动物：兔、犬、猪 4、标牌法 一般挂在动物的颈部、耳朵、脚上或 实验动物：犬、猴 5、烙印法 6、剪毛法;三、实验动物编号与分组;（1）正常对照组　　① 要求　不加任何处理，指在正常条件下进行观察和对照，给药组如是灌胃给药，对照组应用灌胃溶剂。　　② 目的　对比观察模型是否成功；观察被试药能否使病理改变恢复正常。（2）阳性药对照组　　① 要求　所选药必须是药典所有的或国家批准的药，如用西药，则采用公认的，疗效可靠的。　　② 目的　说明所用方法的可靠性；对比新药的优劣和特点。 （3）模型对照组　　① 要求　除不用药外，其他处理同给药组，模型要符合中医证或病的模型。　　② 目的　对比观察受试药的药理作用。;（4）药物组■一般应设三个剂量组，大动物，操作特殊困难者可设两个剂量组； ■能够测出LD50的受试药物，动物试验给药剂量一般为1/10～1/5 LD50； ■很多中药制剂毒性甚小，无法测出LD50者，一般常用人用剂量（g或mg生药/kg体重）来