一株假单胞菌产脱氢酶的产酶条件优化.pdfVIP

第３１卷　 第９期 环　 境　 科　 学　 研　 究 Ｖｏｌ.３１ꎬＮｏ.９ ２０１８年９月 Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｓｅｐ.ꎬ２０１８ 雒晓芳ꎬ王福彬ꎬ陈丽华ꎬ等.一株假单胞菌产脱氢酶的产酶条件优化[Ｊ].环境科学研究ꎬ２０１８ꎬ３１(９):１６２８￣１６３５. ＬＵＯ ＸｉａｏｆａｎｇꎬＷＡＮＧ ＦｕｂｉｎꎬＣＨＥＮ Ｌｉｈｕａꎬｅｔ ａｌ.Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎｚｙｍｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ａ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ.[Ｊ].Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ２０１８ꎬ３１(９):１６２８￣１６３５. 一株假单胞菌产脱氢酶的产酶条件优化 １ ２ １∗ １ 雒晓芳 ꎬ王福彬 ꎬ 陈丽华 ꎬ王冬梅 １.西北民族大学实验中心ꎬ甘肃 兰州　 ７３００３０ ２.西北民族大学生命科学与工程学院ꎬ甘肃 兰州　 ７３００３０ 摘要: 为提高假单胞菌(Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ.)降解蒽、芘过程中产生的脱氢酶量ꎬ以脱氢酶量为指标ꎬ采用Ｂｏｘ￣Ｂｅｈｎｋｅｎ试验设计方 法和响应面分析法(ＲＳＭ)对产酶条件(如温度、盐度以及质量梯度)进行了筛选与优化. 结果表明:假单胞菌降解蒽和芘模型的 Ｐ均小于００５ꎬ表明该模型差异性显著ꎬ回归效果良好. 另外ꎬ假单胞菌降解蒽时的最适产酶条件为盐度３８９％、质量梯度５％、 温度３５７３ ℃ꎬ测得脱氢酶量为(１４０３５３±６４３０)μｇꎬ与预期值(１４１４６６ μｇ)接近ꎬ优化结果可靠. 各因素对脱氢酶量均有显著 性影响ꎬ按影响程度从大到小依次为温度质量梯度盐度. 假单胞菌降解芘时的最适产酶条件为盐度０７３％、质量梯度７％、温 度３４７８ ℃ꎬ测得脱氢酶量为(８４０３２±００６３)μｇꎬ与预期值(８６３０４ μｇ)接近ꎬ优化结果可靠. 各因素对脱氢酶量均有显著性影 响ꎬ按影响程度从大到小依次为质量梯度盐度温度. 可见ꎬ温度是影响假单胞菌降解蒽物质的主要因素ꎬ而质量梯度则是影响 芘的主要因素. 研究显示ꎬ模型对假单胞菌产脱氢酶量的预测可靠ꎬ具有良好的工业应用前景. 关键词: 蒽ꎻ芘ꎻ脱氢酶量ꎻ响应面分析法ꎻ优化 中图分类号: Ｘ５９２　 　 　 　 　 文章编号: １００１￣６９２９(２０１８)０９￣１６２８￣０８ 文献标志码: Ａ ＤＯＩ: １０１３１９８∕ｊｉｓｓｎ１００１￣６９２９２０１８０６１７ Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｎｚｙｍｅ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ａ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ. １ ２ １∗ １ ＬＵＯ Ｘｉａｏｆａｎｇ ꎬＷＡＮＧ Ｆｕｂｉｎ ꎬＣＨＥＮ Ｌｉｈｕａ ꎬＷＡＮＧ Ｄｏｎｇｍｅｉ １.Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔꎬＮｏｒｔｈｗｅｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｆｏｒ ＮａｔｉｏｎａｌｉｔｙꎬＬａｎｚｈｏｕ ７３００３０ ２.Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ ＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇꎬＮｏｒｔｈｗｅｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｆｏｒ ＮａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓꎬＬａｎｚｈｏｕ ７３００３０ꎬＣｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ａ ｈｉｇｈ￣ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ. ｗａｓ ｓｅｐａｒａｔｅｄｆｒｏｍ ｏｉｌ￣ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄ ｓｏｉｌ ａｎｄ ｉｔｓｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｔｏｗａｒｄ ａｎｔｈｒａｃｅｎｅ ａｎｄ ｐｙｒｅｎｅｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ. Ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ (ＤＡ)ꎬｔｈｅ Ｂｏｘ￣Ｂｅｈｎｋｅｎ ｍｏｄｅｌ ａｎｄ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ (ＲＳＭ)ｗｅｒｅ ａｄｏｐｔｅｄ ｔｏ ｓｃｒｅｅｎ ａｎｄ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈ