抗除草剂转基因大豆的分子特征分析-生物工程专业毕业论文.docxVIP

浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。 除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果， 也不包含为获得油吁江大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作 的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者妊他姚签字日期易彤年形月哆曰学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解浙江大学有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文 的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权油f江大学可以将学位论文的全部或 部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：鸭乞乞／夏导师签名：签字日期．蒯年彩月7日签字日期：硼76年6月了日万方数据目录目录I致谢IV摘要V第一章文献综述．．11．1转基因原理及全球转基因作物发展概述11．1．1转基因原理．11．1．2全球转基因作物发展．11．1．3转基因大豆研究历史．31．2抗除草剂大豆的原理和现状81．2．1抗草甘膦大豆作用机理．91．2．2抗除草剂转基因大豆的发展现状1 01．2．3转基因大豆安全性问题lol-3转基因事件的分子特征g,：t-Y转基因安全的重要性．12 1．3．1转基因事件的分子特征是转基因新品种研发的安全基础 121．3．2转基因事件的分子特征是转基因生物安全评价的重要内容1 21．3．3转基因事件的分子特征是转基因生物检测监测技术建立的依据 1 31．4转基因植物安全评价分子特j：iE_-t要研究内容．1 31．4．1目的基因在植物基因组中的整合情况13万方数据1．4．2目的基因在植物基因组中的表达情况1 91．5研究目的与意义．191．5．1工作目的l 91．5．2研究意义20第二章材料与方法212．1实验材料212．2实验方法212．2．1目的基因的PCR分析．212．2．2插入位点侧翼序列扩增222．2．3外源基因插入拷贝数分析262．2．4转基因大豆植株的蛋白表达分析292．2．5转基因大豆植株的基因表达分析3 1第三章实验结果343．1转基因大豆目的基因在植物基因组中的整合结果．343．1．1目的基因的PCR检测结果．343．1．2目的基因插入位点分析方法优化及结果343．1．3 Southern杂交法验证目的基因的拷贝数403．2转基因大豆外源插入片段的表达情况．413．2．1转基因大豆叶片蛋白表达产物结果分析41万方数据3．2．2转基因大豆中目的基因表达结果分析42第四章小结与讨论444．1转基因大豆目的基因在植物基因组中的整合结果分析．444．2转基因大豆外源插入片段的表达情况．45参考文献47攻读硕士期间的研究成果．．52万方数据致谢光阴荏苒转眼在职研究生的求学生活即将结束。回首这几年的求学之路， 有艰辛的学习过程，有获取新知识和技能的欣悦，值此毕,1 1,i2文完成之际，我谨 向所有关心、爱护、帮助过我的人们表示最诚挚的感谢和最美好的祝愿。首先，我要感谢我的导师寿惠霞教授。恩师严谨的治学态度、科学的治学方 法、渊博的学识、诲人不倦的精神，朴实无华、平易近人的人格魅力都深深影响 着我。她以她女性教师所特有的母爱，对每一个学生都像对待自己的孩子一样， 从学习、工作和生活上都给予无私的关怀和帮助。研究生学习期间，我的每一步 成长都倾注着恩师的心血，感谢她倾注了大量的心血，从选题到开题报告，从写 作提纲，到一遍又一遍地修改论文，严格把关，循循善诱，她对我的影响足以让 我受益终生。在此，谨向我敬爱的导师寿惠霞教授表示我最深切的谢意与祝福!本论文的完成也离不开我的同事、同学和朋友的关心与帮助。感谢浙江大学 陆玲鸿博士，浙江省农科院的徐俊锋博士、汪小福、刘慧、缪青梅和朱姝晴，我 的师妹宋张悦等在科研过程中给予的帮助和指导，在生活上给予的关心和帮助： 感谢浙大农学院昆虫研究所沈志成老师在研究材料上的惠赠和科研过程中的指 导；感谢合肥农科院张磊老师在大豆转基因材料的中间试验匕的管理和帮助。最后，还要特别感谢我的爱人、孩子、父母亲，感谢他们—直以来对我默默 的支持和关怀，谢谢你们，你们永远是我最爱最珍惜的人!在此，祝福大家都能健康快乐!陈笑芸 2015年3月于浙大紫金港万方数据摘要大豆是我国重要的蛋白和油料作物，在农!比生产中具有不可或缺的地位。利 用基因工程手段将与抗除草剂有关的基因转入大豆，育成高抗除草剂大豆品种， 可节约大豆生产中人工除草的成本，降低草害，提高大豆的产量。本研究培育的ZUTS．3 1、ZUTS．32和ZUTS．33三个抗草甘膦除草剂转基因 大豆株系，是通过农杆菌介导的方法，将来自耐辐射球菌(Deinococcus